免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
OCT2  陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2膽酸二烯酸新戊二酯Human HO2 (Heme Oxygenase 2) 檢測(cè)試劑盒

Oct-4(Octamer-4)  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白豬去氧膽酸2-羥基-3-三氟甲基吡啶Human PC (Plasma Aicoagula Protein C) 檢測(cè)試劑盒

Oct-4(Octamer-4)  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白去氧膽酸2-羥基-3-三氟甲基吡啶Human PS (Plasma Aicoagula Protein S) 檢測(cè)試劑盒

ODC  鳥氨酸脫羧酶芝麻素7-羥基-3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮Human SEPP1 (Selenoprotein P, Plasma) 檢測(cè)試劑盒

OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase  8-羥基鳥嘌呤DNA糖基化酶芝麻林素7-羥基-3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮Human HA (Hemagglutinin) 檢測(cè)試劑盒

Omgp  少突細(xì)胞髓磷脂糖蛋白左旋多巴7-羥基-3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮Human SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) 檢測(cè)試劑盒

ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白紫杉1-氨基環(huán)丁烷羧酸Human ALB (Albumin) 檢測(cè)試劑盒

OLFM1  嗅球蛋白1梔子苷1-氨基環(huán)丁烷羧酸Human SAA (Serum Amyloid A) 檢測(cè)試劑盒

范可尼貧血相關(guān)蛋白MMonkey PLC (Phospholipase C) 檢測(cè)試劑盒

軟骨細(xì)胞Ezrin樣蛋白Monkey APSA (Ai-Phosphatidyl Serine Aibody) 檢測(cè)試劑盒

慢性粒細(xì)胞白血病33Monkey C3c (Compleme Fragme 3c) 檢測(cè)試劑盒

白血病病C亞類受體蛋白FLVCRMonkey PRG4 (Proteoglycan 4) 檢測(cè)試劑盒

富含亮氨酸跨膜纖連蛋白1Monkey C4 (Compleme Compone 4) 檢測(cè)試劑盒

富含亮氨酸跨膜纖連蛋白2Monkey BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) 檢測(cè)試劑盒

富含亮氨酸跨膜纖連蛋白3Monkey GSTα4 (Glutathione S Transferase Alpha 4) 檢測(cè)試劑盒

牛纖維蛋白原Monkey MAPKAPK3 (Mitogen Activated Protein Kinase Activated Protein Kinase 3) 檢測(cè)試劑盒
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Aureobasidium│pullulans提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Hericium erinaceus安全等級(jí): 4模式株: no

Coronavirus│Infectious bronchitis virus分離基物: 病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式株: no實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性，并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。同時(shí)，篩選合適的疫苗株制備新型疫苗。培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37

Rhizopus│tonkinensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0015生長(zhǎng)條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

Penicillium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no抗大腸桿、黑曲霉培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C液氮超低溫凍結(jié)；-80℃冰箱凍結(jié)

Clostridium│acetobutylicum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)丙酮丁醇。培養(yǎng)基: CM0162生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法；定期移植法

Bacillus│sublitis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 28-30℃真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Escherichia│coli分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

Cunninghamella elegans提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然。生長(zhǎng)條件: 24-28℃，好氧液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法