當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 | CNTD2 | BJ-K7963 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基表皮角化細(xì)胞ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原)
卵黃甘露高鹽瓊脂基礎(chǔ)前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基真皮成纖維細(xì)胞fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)
改良Giolitti-Cantoni 肉湯前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基軟骨細(xì)胞FLIP S/L peptide 凋亡調(diào)節(jié)基因之一(多肽抗原)
Vogel–Johnson 瓊脂基礎(chǔ)間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基破骨細(xì)胞FoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)
哥倫比亞CNA瓊脂間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基皮膚肥大細(xì)胞GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷氨酸脫羧酶-65(抗原)
堿性蛋白胨水(APW)間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基前脂肪細(xì)胞GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關(guān)蛋白-43(抗原)
堿性蛋白胨水(APW)平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基成骨細(xì)胞Gastrin 胃泌素(抗原)
堿性蛋白胨水(APW)神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基?;o酶A消旋酶抗原
Melamine/Biotin 生物素標(biāo)記兔抗三聚胺IgG過敏毒素C3(補體C3)2,5-二甲氧基二Rat Hp-IgM (Helicobacter Pylori IgM) 檢測試劑盒
GHR /FITC 熒光素標(biāo)記生長激素受體IgG癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1-甲基-L-組氨酸Rat PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) 檢測試劑盒
Ghrelin/FITC 熒光素標(biāo)記腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)IgG細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白11-甲基-L-組氨酸Rat PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ) 檢測試劑盒
GHRF/GHRH /FITC 熒光素標(biāo)記生長激素釋放激素因IgG半胱氨酸蛋白酶抑制劑71-甲基-L-組氨酸Rat PPAR-α (Peroxisome Proliferators Activator Receptors alpha) 檢測試劑盒
GIP/FITC 熒光素標(biāo)記胃泌素抑制肽IgG22號染色體開放閱讀框29BOC-L-4-氨酸Rat PI Ab-IgG/IgM (Phosphatidylinositol Antibody IgG/IgM) 檢測試劑盒
TNFRSF18/FITC 熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體IgG神經(jīng)細(xì)胞表面蛋白F3BOC-L-4-氨酸Rat P-PKC (Phospho Protein Kinase C) 檢測試劑盒
GIG8/ID2/FITC 熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2IgG組織蛋白酶CBOC-L-4-氨酸Rat PERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) 檢測試劑盒
Glasses Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗眼鏡蛇蛇毒蛋白(眼鏡蛇)IgG半胱胺酸蛋白酶蛋白-4雙(三環(huán)己基磷)鈀(0)Rat PIKBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF-KBα) 檢測試劑盒
細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體多孢霉Mouse ITGB3 (Integrin Beta 3) Kit
諾爾斯氏鏈霉Mouse MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) Kit
乳酸乳球乳亞種Mouse MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) Kit
棘托竹蓀Mouse MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) Kit
假蒼白桿Mouse H4 (Histone H4) Kit
臭曲霉Mouse MHCI/H-2Ⅰ(Major Histocompatibility ComplexⅠ) Kit
*枯草芽胞桿Mouse MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ(Major Histocompatibility Complex-Ⅱ) Kit
球色單隔孢屬Mouse MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ(Major Histocompatibility Complex-Ⅲ) Kit
多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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