大鼠轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測(cè)試劑盒
需要而未提供的試劑和器材
37℃恒溫箱
標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為240 pg/ml，160 pg/ml，80 pg/ml，40 pg/ml，20 pg/ml）。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
大鼠轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
DEAE 葡聚糖    10g    
DEAE 葡聚糖凝膠 A-25    25g    蛋白酶抑制劑混合液
DEAE 葡聚糖凝膠 A-50    25g    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 1
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B    25mL    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 2
快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠    25mL    細(xì)菌蛋白酶抑制劑
脫氧膽酸    10g    哺乳動(dòng)物蛋白酶抑制劑
脫氧膽酸鈉    10g    植物蛋白酶抑制劑
小牛胸腺 DNA    50mg    酵母蛋白酶抑制劑
鮭魚(yú)精 DNA    100mg    His 標(biāo)簽蛋白蛋白酶抑制劑
脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )    25mg    組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑
焦碳酸二乙酯    10mL    α2巨球蛋白
地塞米松    100mg    AEBSF 溶液，10mg/mL
藍(lán)色葡聚糖 2000    1g    抗凝血酶Ⅲ，10mg/mL
硫酸葡聚糖    10g    APMSF 溶液，10mg/mL

大鼠轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測(cè)試劑盒