當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA 實(shí)驗(yàn)中各類組織勻漿收集過程
ELISA 實(shí)驗(yàn)中各類組織勻漿(容易勻漿的組織)的采集、處理和保存;(需要測蛋白濃度)
1、 采集組織,在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱重,剔除附屬的結(jié)締組織,稱取組織塊。
2、用移液管量取 0.1M PBS 或者用 0.86%冷生理鹽水,勻漿介質(zhì)或生理鹽水的體積總量應(yīng)該是組織塊重量的 9 倍,用眼科小剪盡快剪碎組織塊(天然時操作要在冰水浴中進(jìn)行,將盛有組織 的小燒杯放入冰水中)。
3、勻漿的方式有多種:
a) 手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的 1/3 勻漿介質(zhì)或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿管中進(jìn)行勻漿,左手持勻漿管將下 端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6~8 分鐘),充分研碎,使組織勻漿化。
b) 機(jī)器勻漿:用組織搗碎機(jī) 10000~15000r/min 上下研磨制成 10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備(勻漿時間 10 秒/次,間隙 30 秒,連續(xù) 3~5 次,在冰水中進(jìn)行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
4、將制備好的 10%勻漿用離心機(jī) 4℃,3000rpm 離心 15min,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
5、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/span>
2-8℃下,可放置保存 24-48 小時;
-20℃下,可放置保存 1 個月;
-70℃下,可放置保存 6 個月;
6、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種 ELISA 測定。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。