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ELISA試劑盒檢測血清注意要點

時間:2022/8/30閱讀:274
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     ELISA試劑盒檢測血清使用說明     大部分elisa檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,?菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反應(yīng)。

    ELISA試劑盒檢測血清注意要點:

1、要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色。

2、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。

3、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。

4、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性攪擾。

5、血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。


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