去PCR產(chǎn)物中引物二聚體的方法，包括：1)采用超濾離心法對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化；2)使用磁珠法對(duì)1)中獲得的產(chǎn)物進(jìn)行純化，以進(jìn)一步去引物二聚體；其中，所述PCR產(chǎn)物和引物二聚體的大小差值為20bp～170bp。
目前，在高通量測(cè)序的文庫(kù)構(gòu)建時(shí)通常采取磁珠法(例如，CN107236726A和CN106701737A)，其原理為：加入不同體積比例的磁珠試劑會(huì)吸附不同片段大小的DNA，當(dāng)加入磁珠體積越少時(shí)，吸附的大片段越多。因此，當(dāng)PCR產(chǎn)物片段與引物二聚體大小相差較大(例如180bp)時(shí)，磁珠法在去除蛋白質(zhì)、鹽離子等雜質(zhì)的同時(shí)也能夠去除引物二聚體；而當(dāng)PCR產(chǎn)物與引物二聚體大小相差不大時(shí)，磁珠法雖然仍能夠去除雜質(zhì)，但卻無(wú)法將PCR產(chǎn)物和引物二聚體很好地區(qū)分開(kāi)來(lái)，因而純化效果不佳。有鑒于此，在本領(lǐng)域中存在對(duì)大小差距不大的PCR產(chǎn)物與引物二聚體進(jìn)行有效分離的強(qiáng)烈需求。
PCR擴(kuò)增過(guò)程中往往會(huì)產(chǎn)生引物二聚體，而這些引物二聚體導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，且會(huì)參與到文庫(kù)構(gòu)建以及后續(xù)的測(cè)序中。在測(cè)序時(shí)，過(guò)多的引物二聚體會(huì)占用測(cè)序通量，從而增加測(cè)序成本，因此在PCR擴(kuò)增后去除引物二聚體是非常必要的。目前去除引物二聚體的方法主要采用的是磁珠法、割膠回收等方法。