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elisa分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)方法具體有哪些

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elisa分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)方法具體有哪些
1、從披針葉黃華種子中提取
a、稱取披針葉黃華種粒粉末 500 g,將粉末置于錐形瓶中;用 1000 mL 95 %的乙醇浸取 ,用鹽酸調(diào)節(jié)其 pH 值至酸性,攪拌 5 h ,過(guò)濾得溶液;用萃取該溶液 3 次,每次用 100 mL,將得到的水相溶液用10%的 KOH 調(diào)節(jié) pH =10,再用萃取該堿性溶液,并與前 3 次萃取所得的合并;用鹽酸溶液萃取,靜置、分層后保留水相,棄去有機(jī)相.用 10%的 KOH 溶液調(diào)節(jié)水溶液至 pH =10 后;用萃取,將得到的有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥,過(guò)濾后蒸干,得到粗堿 2.68 g,用丙酮重結(jié)晶,干燥后得本品。
b、稱取披針葉黃華種粒粉末 500 g,在錐形瓶中用 25 %~ 28 %的氨水堿化18 h ,將堿化后的粘稠物傾入三口瓶中,加入回流,在粘稠物中加入甲醇, 使粘稠物變?yōu)榉稚⑾啵浑x心得到 3 層溶液(上層為甲醇相,中層為雜質(zhì) ,層為相);甲醇相堿化后用提取,將 2 次得到的合并,用 2%的鹽酸溶液萃取,分離,調(diào)節(jié)水相至中性并濃縮得到絮狀沉淀,過(guò)濾該絮狀沉淀,,將濾液堿化,用萃取該堿性溶液2 次 ,合并 2 次的萃取液;將溶液干燥 、過(guò)濾 、蒸干,得到粗堿 4 .4 g .將粗堿用丙酮重結(jié)晶, 干燥 , 得到針狀晶體 2.14 g ,濃縮濾液后再次重結(jié)晶、干燥得本品。
2、從沙冬青種子中提取
取沙冬青種子干粉500g,用甲醇70℃水浴回流提取6次,合并甲醇液,減壓回收溶劑得浸膏,揮干至恒重,浸膏用鹽酸處理后得酸水液,酸水液先用萃取數(shù)次,以除去部分色素,棄去液,然后酸水液用氫氧化鈉調(diào)pH至9~11,再用萃取得本品。
3、從毒豆中提取
a、1 公斤種子粉末,以10%KOH 溶液堿化后以進(jìn)行滲滴或連續(xù)提取器至提取*;提取液回,殘余物加入500 毫升鹽酸過(guò)濾,濾液用活性炭脫色后過(guò)濾;活性炭上吸附的金雀花堿以熱草酸溶液洗脫,酸液合并,以10%KOH 溶液堿化后 以提取;液以無(wú)水硫酸鈉脫水后濃縮,于濃縮液中加入沸程 30~60℃的石油醚,金雀花堿呈微黃白色沉淀析出,濾后于80°干燥。
b、種子粉末以苯與石油醚依次處理,脫脂粉末置空氣中以除盡石油醚,然后以10%KOH 溶液堿化,并以提取,余同a法處理。
c、將a法中脫脂后的酸水溶液加Mayer氏試劑,金雀花堿生成四碘汞鹽析出。將此沉淀與水共研細(xì),以硫化鈉處理使復(fù)鹽分解,金雀花堿游離,濾去硫化汞沉淀,酸水溶液加氫氧化鉀溶液堿化,以提取,余同a法處理。

 

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