elisa分析檢測試劑盒測定的陽性判斷值, 通常是將大量陰性和陽性人群的測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后確定的, 其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽性和假陰性率。在陽性判斷值周圍一定范圍內(nèi)之外的測定結(jié)果可歸為可疑, 亦即ELISA 測定的“灰區(qū)”。“灰區(qū)”的大小可用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定。測定結(jié)果處于“灰區(qū)”的樣本, 可通過確認(rèn)試驗(yàn)或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區(qū)”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。
現(xiàn)分析如下。
1 方法學(xué)的影響：
測定模式包括以下幾種: 雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM 抗體捕捉法、競爭抑制法, 其中競爭抑制法因受操作時(shí)差所引起的gong平競爭等因素的影響, 結(jié)果重復(fù)性較差, 質(zhì)量較難控制。
2 試劑因素：
試劑的選擇 免疫檢測的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過程受多種因素的影響, 如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等, 因而檢測結(jié)果難以溯源, 不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號(hào)間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測的水平, 因此在引入新項(xiàng)目之前必須對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。試劑的評(píng)估有以下幾個(gè)步驟: (1) 確定開展該項(xiàng)目的必要性; (2) 了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測方法和原理; (3) 在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標(biāo)準(zhǔn)參考方法或參考物質(zhì), 其次為臨床的滿意度及機(jī)構(gòu)的報(bào)告如各級(jí)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)、CDC 報(bào)告等; (4) 定期對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行追蹤反饋直至*終認(rèn)可該試劑。
3 樣本因素：
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等, 后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。其中外源性干擾因素是我們?cè)跈z測過程中可以避免也是必須避免的因素, 而避免內(nèi)源性因素的干擾則主要通過選擇合適的試劑盒。在臨床中遇到少見的疑難病例時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮到內(nèi)源性干擾因素的存在。