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elisa分析檢測試劑盒試驗洗滌步驟注意事項

時間:2018/6/8閱讀:210
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elisa分析檢測試劑盒試驗洗滌步驟注意事項
1)浸泡式ELISA 洗滌:
a.吸干或甩干孔內(nèi)反應液;
b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
c.浸泡,即將洗 滌液注滿板孔,放置 1-2 分 鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙 上拍干;
e.重復操作 c 和 d,洗滌 3-4 次(或按說明規(guī)定)。
在間接法中 如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。 微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是 疏水性的,非離子型洗滌 劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質(zhì)的疏水基團借疏水鍵結(jié)合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團 和水分子的結(jié)合作用,使蛋白質(zhì)回復到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。 洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20,其濃度可在 0.05%-0.2%之間,高于 0.2%時,可使包被在固相上的抗原或 抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
(2)流水沖洗式ELISA 洗滌,流水沖洗法*初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗 ,持續(xù)沖洗 2 分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡 2 分鐘,吸干即可。
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