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elisa試劑盒
原代細(xì)胞
細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)試劑
血清
細(xì)胞因子
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
RNA/DNA提取
PCR檢測(cè)試劑盒
elisa kit
細(xì)胞
PCR基因檢測(cè)試劑盒
菌種
科研抗體
生化檢測(cè)試劑盒
檢測(cè)試劑盒
PCR相關(guān)試劑

進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟

時(shí)間:2016/12/5閱讀:169
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進(jìn)口elisa試劑盒主要有以下系列:1.細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒 2.內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒 3.肝纖維化檢測(cè)試劑盒 4.心肌梗塞檢測(cè)試劑盒 5.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒 6.自身免疫檢測(cè)試劑盒 7.優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒 8.傳染病檢測(cè)試劑盒 等等;
種屬有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;植物。
ELISA試劑盒主要有以下系列:1.細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒 2.內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒 3.肝纖維化檢測(cè)試劑盒 4.心肌梗塞檢測(cè)試劑盒 5.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒 6.自身免疫檢測(cè)試劑盒 7.優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒 8.傳染病檢測(cè)試劑盒 等等;
種屬有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;植物。
進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
注:
1.試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
CBZ-甘氨酸甲酯    號(hào):    1212-53-9    說(shuō)明書
乙基香蘭素    號(hào):    121-32-4    報(bào)價(jià)
香草酸    號(hào):    121-34-6    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
二環(huán)庚二烯    號(hào):    121-46-0    現(xiàn)貨供應(yīng)
3-氨基苯磺酸    號(hào):    121-47-1    說(shuō)明書
N-Boc-N-甲基乙二胺    號(hào):    121492-06-6    報(bào)價(jià)
對(duì)氯甲基苯甲酸叔丁酯    號(hào):    121579-86-0    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
2-氨基-5-硝基噻唑    號(hào):    121-66-4    現(xiàn)貨供應(yīng)
2-氯-4-硝基甲苯    號(hào):    121-86-8    說(shuō)明書
2-氯-4-硝基苯胺    號(hào):    121-87-9    報(bào)價(jià)
碘    號(hào):    12190-71-5    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
甲氨基乙醛縮二甲醇    號(hào):    122-07-6    現(xiàn)貨供應(yīng)
BOC-DAP(FMOC)-OH    號(hào):    122235-70-5    說(shuō)明書
氫氧化鋇(八水)    號(hào):    12230-71-6    報(bào)價(jià)
3,5-二氟苯乙腈    號(hào):    122376-76-5    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
亞磷酸三乙酯    號(hào):    122-52-1    現(xiàn)貨供應(yīng)
(S)-3-叔丁氧羰基氨基吡咯烷    號(hào):    122536-76-9    說(shuō)明書
4,4-二氟環(huán)己甲酸    號(hào):    122665-97-8    報(bào)價(jià)
1-Boc-吡咯烷-3-甲酸甲酯    號(hào):    122684-33-7    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
3,4-二甲氧基苯硼酸    號(hào):    122775-35-3    現(xiàn)貨供應(yīng)
4-氨基乙酰苯胺    號(hào):    122-80-5    說(shuō)明書
進(jìn)口elisa試劑盒

 

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