當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>感覺態(tài)細胞>>克隆感受態(tài)細胞>> C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
本公司供應的C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細產(chǎn)品名稱的說明書或價格信息,點擊了解更多公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝
包裝:100ul*100
分類:表達感受態(tài)細胞
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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操作方法:
1. C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
* 小鼠頜下腺上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠滑膜成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠肌衛(wèi)星細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠脊髓神經(jīng)元5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠狀腺成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠狀腺上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
* 小鼠角膜基質(zhì)細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞原代細胞 *
小鼠心肌細胞,MCM細胞原代細胞 原裝/進口
小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞原代細胞
小鼠星形膠質(zhì)細胞,MA細胞原代細胞 *
小鼠胸腺成纖維細胞原代細胞 原裝/進口
小鼠胸腺基質(zhì)細胞原代細胞
人食道平滑肌細胞微小RNA HESMC miRNA *
人腸微血管內(nèi)皮細胞微小RNA HIMEC miRNA 原裝/進口
C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝胎蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白異質(zhì)體1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白異質(zhì)體2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
胎蛋白異質(zhì)體3檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
基CpG結合蛋白2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
基CpG結合蛋白2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
基多巴1α檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
技術傳授:
C58C1 感受態(tài)細胞100ul*100包裝凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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