當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>感覺態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞>> Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50
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產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱:Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買
包裝:100ul*50
分類:表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞
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技術(shù)傳授:
Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
本公司供應(yīng)的Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)產(chǎn)品名稱的說明書或價格信息,點(diǎn)擊了解更多公司產(chǎn)品。
操作方法:
1. Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
* 大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞,CTX細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠癌細(xì)胞,MADB106細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化,PC12低分化細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 高分化,PC12高分化細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化,PC12未分化細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠腎細(xì)胞,NRK-52E細(xì)胞 英文名稱:
* 大鼠腎小球系膜細(xì)胞,HBZY-1細(xì)胞 英文名稱:
大鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞
大鼠腎系膜細(xì)胞,RRMC細(xì)胞原代細(xì)胞 *
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞總RNA HSkMSC tRNA 原裝/進(jìn)口
人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNA HSkMM tRNA
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HRGEC tRNA *
人腎近曲小管上皮細(xì)胞總RNA HRPTEpiC tRNA 原裝/進(jìn)口
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNA HRCEpiC tRNA
人腎上皮細(xì)胞總RNA HREpiC tRNA *
Rosetta-gami 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50哪里有買TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子13檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
TATA盒結(jié)合蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
TBC1域家族成員10C檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
TBP結(jié)合轉(zhuǎn)錄向下調(diào)節(jié)因子1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Tectonic 1蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Tectonic 2蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Tectonic 3蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
TERF1相互作用核因子2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Tescalcin蛋白檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
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