您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>其它細(xì)胞系>> 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞
貨號(hào) | AXB2846 | 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
英文名稱(chēng) | MHCC97-H細(xì)胞 | 產(chǎn)品分類(lèi) | 細(xì)胞系 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
細(xì)胞傳代:
1. 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號(hào)筆,培養(yǎng)皿,離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來(lái)為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細(xì)胞分散開(kāi)。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染:
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來(lái)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。
半胱胺suan蛋白mei-2封閉多肽 | 諾如病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo) |
人腺病毒D56型PCR試劑盒 | 冠蛋白7ELISA試劑盒 |
人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)試劑盒 ELISA | 睪丸受體2ELISA試劑盒 |
人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 ELISA | 叉頭框蛋白C1ELISA試劑盒 |
小鼠粘蛋白/粘液su7(MUC7)試劑盒elisa | 高爾基體蛋白A8家族成員AELISA試劑盒 |
免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) ELISA檢測(cè)試劑盒 | 原鈣黏suβ14ELISA試劑盒 |
3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23封閉多肽 | 大片吸蟲(chóng)PCR試劑盒 |
液泡膜質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPmei2型封閉多肽 | 流行性造血器官壞死病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Endokinin-A/B封閉多肽 | 犬艾利希體PCR試劑盒 |
原肌球蛋白1封閉多肽 | 單純皰疹病毒(HSV)核suan檢測(cè)試劑盒 |
Ero1-Lβ蛋白封閉多肽 | 禽致病性大腸桿菌1血清型PCR試劑盒 |
PRDM鋅指轉(zhuǎn)錄因子PRDM4封閉多肽 | 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞瘰疬分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移mei1封閉多肽 | 羅斯河病毒RT-PCR試劑盒 |
C型凝集su結(jié)構(gòu)域家族1成員B封閉多肽 | 禽腺病毒C型PCR試劑盒 |
原鈣粘蛋白γA2封閉多肽 | 禽皰疹病毒通用PCR試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:
①進(jìn)無(wú)菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開(kāi)始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開(kāi)或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼,以防退火;燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用;已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開(kāi)瓶,開(kāi)瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專(zhuān)管專(zhuān)用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。