當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞
貨號 | A01X688 | 規(guī)格 | 1×106 |
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英文名稱 | CFPAC-1細(xì)胞 | 產(chǎn)品分類 | 人細(xì)胞系 |
實(shí)驗(yàn)類型 | IMDM+10%FBS+1%P/S | 報告 | 提供STR鑒定報告 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
名稱 | CFPAC-1 (人胰腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | CFPac-1; CF PAC-1; CF-PAC1; CF-Pac1; CF Pac1; CFPAC1; CFPac1; CFPAC |
種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
背景描述 | CFPAC-1細(xì)胞是胰腺管腺癌細(xì)胞系,建自26歲白人男性囊性纖維變性(CF)的肝轉(zhuǎn)移灶。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)囊性纖維變性跨膜調(diào)節(jié)因子(CFTR),CFPAC-1細(xì)胞形態(tài)為上皮細(xì)胞樣且頂端微絨毛極化。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)胰腺管細(xì)胞特征性的細(xì)胞角蛋白和癌胚抗原,倍增時間為30-32小時。CFPAC-1細(xì)胞是亞3倍體的細(xì)胞系,36%的細(xì)胞的染色體模式數(shù)為75。CFPAC-1細(xì)胞傳代至24代時,可在免疫抑制小鼠中致瘤。 |
年齡(性別) | 男;26歲 |
組織來源 | 胰腺管腺癌,肝轉(zhuǎn)移 |
細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類型 | 胰腺癌細(xì)胞 |
生物安全等級 | 1 |
倍增時間 | ~30-45 hours |
致瘤性 | Yes, in nude mice (passage 34) |
抗原表達(dá)情況 | CA19-9 antigen, 12000 units/mL, epithelial keratins |
基因表達(dá)情況 | carcinoembryonic antigen (CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL; epithelial keratins |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501 |
細(xì)胞傳代:
1. 試驗(yàn)準(zhǔn)備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養(yǎng)皿,離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細(xì)胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細(xì)胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染:
1.CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。
磷suan化非受體酪氨suan激meic-Abl封閉多肽 | 山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 |
人鼻病毒通用RT-PCR試劑盒 | 蛋白精氨suan脫亞氨mei4ELISA試劑盒 |
人U型肌suan激mei,線粒體(CKMT1A)試劑盒ELISA | 大腸癌專一抗原2ELISA試劑盒 |
人轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)ELISA試劑盒 | Cullin3蛋白ELISA試劑盒 |
人多功能蛋白聚糖(VS)試劑盒ELISA | 叢狀蛋白B1ELISA試劑盒 |
人鈣離子通道抗體(IgG)檢測試劑盒elisa | 補(bǔ)體片斷4bELISA試劑盒 |
NT5C3蛋白封閉多肽 | 傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)核suan檢測試劑盒 |
豬乙腦病毒包膜蛋白封閉多肽 | 禽肺病毒(APV)核suan檢測試劑盒 |
CD59封閉多肽 | 豬細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒 |
腫瘤相關(guān)抑制劑1封閉多肽 | 登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR檢測試劑盒 |
CD8封閉多肽 | 馬蛔蟲PCR檢測試劑盒 |
活化半胱胺suan蛋白mei蛋白-3封閉多肽 | CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞病毒基因分型PCR檢測試劑盒 |
生長激su釋放激su同源盒蛋白1封閉多肽 | 禽傳染性支氣管炎病毒通用RT-PCR試劑盒 |
雄激su受體封閉多肽 | 馬爾太蟲通用PCR試劑盒 |
磷suan化絲裂原活化蛋白激mei3封閉多肽 | 馬杜拉放線菌PCR試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:
①進(jìn)無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。
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