DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	A01X699	規(guī)格	1×106
英文名稱	DAMI細(xì)胞	產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	1640+10%FBS+1%P/S	報(bào)告	提供STR鑒定報(bào)告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	Dami (人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞)
別稱	DAMI
種屬	人
生長(zhǎng)特性	懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	巨核細(xì)胞樣
生長(zhǎng)培養(yǎng)基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
推薦傳代比例	1×10^5-1×10^6個(gè)/mL
推薦換液頻率	2~3次/周
背景描述	Dami細(xì)胞是一株從一個(gè)巨核細(xì)胞白血病患者的血液建立的人類巨核細(xì)胞。Dami細(xì)胞以懸浮生長(zhǎng)為主，細(xì)胞群體倍增時(shí)間是24-30小時(shí)。至少89%的Dami細(xì)胞可與血小板糖蛋白(GP)Ⅰb、Ⅱb、Ⅲa及血型糖蛋白單克隆抗體反應(yīng)。Dami細(xì)胞不與抗淋巴腺、單核細(xì)胞、粒性白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞抗原的抗體反應(yīng)。Dami細(xì)胞為研究巨核細(xì)胞生化及分化提供了好的模型。(STR鑒定位點(diǎn)與HEL一致）
年齡（性別）	30歲
組織來源	巨核細(xì)胞白血病
細(xì)胞類型	腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型	白血病細(xì)胞
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CRL-9792

細(xì)胞傳代：

1. DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

L-組氨suan脫羧mei封閉多肽	禽腺病毒(FADV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
泰澤隱孢子蟲PCR試劑盒	蛋白酪氨suan磷suanmei受體RELISA試劑盒
人α1suan性糖蛋白(α1-AGP)ELISA檢測(cè)試劑盒	單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型ELISA試劑盒
人單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒elisa	表皮細(xì)胞活化肽因子ELISA試劑盒
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒	促胰液su受體ELISA試劑盒
人富組氨suan糖蛋白(HRG)試劑盒ELISA	丙型肝炎病毒ELISA試劑盒
細(xì)胞分裂周期蛋白7封閉多肽	豬水皰性口炎(VSV)核suan檢測(cè)試劑盒
電壓門控鉀通道亞基Kv7.4封閉多肽	禽傳染性喉氣管炎病毒(AiLTV)PCR檢測(cè)試劑盒（熒光-PCR法）
CD73封閉多肽	轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測(cè)試劑盒
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP 8L2封閉多肽	肺耐藥蛋白基因PCR檢測(cè)試劑盒
CD98輕鏈封閉多肽	馬類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒
神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白封閉多肽	DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞病毒H7亞型PCR檢測(cè)試劑盒
磷suan化干擾su誘導(dǎo)的雙鏈RNA活化蛋白激mei封閉多肽	禽傳染性支氣管炎病毒Delaware型RT-PCR試劑盒
9號(hào)染色體開放閱讀框84封閉多肽	馬可尼小囊蟲PCR試劑盒
RASAL3蛋白封閉多肽	馬蛔蟲PCR試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。