DU145人前列腺癌細胞-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	A01X706	規(guī)格	1×106
英文名稱	DU145細胞	產(chǎn)品分類	人細胞系
實驗類型	MEM+10%FBS+1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	DU 145 (人前列腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱	DU-145; Du-145; DU 145; DU_145; Duke University 145
種屬	人
生長特性	貼壁細胞
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基	MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
背景描述	DU 145細胞是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移病灶損害中建株的。DU 145細胞和從軟瓊脂中分離到的細胞不具有可檢測的激素敏感性，酸性磷酸酶呈弱陽性。對DU 145細胞及原始腫瘤細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛，微絲及細胞橋粒，有許多線粒體，發(fā)育良好高爾基體和異質(zhì)溶酶體。DU 145細胞不表達前列腺抗體。
年齡（性別）	男；69歲
組織來源	前列腺；轉(zhuǎn)移灶；腦癌
細胞類型	腫瘤細胞
腫瘤類型	前列腺癌細胞
生物安全等級	1
倍增時間	~30-40 hours
致瘤性	Yes, in nude mice; forms adenocarcinoma (grade II) consistent with prostatic primary.
抗原表達情況	Blood Type O; Rh+
保藏機構(gòu)	ATCC; HTB-81 BCRC; 60348 BCRJ; 0078 DSMZ; ACC-261

細胞傳代：

1. DU145人前列腺癌細胞試驗準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

電壓門控鉀通道亞基Kv7.4封閉多肽	流產(chǎn)嗜衣原體PCR檢測試劑盒直銷
煙曲霉PCR試劑盒	蛋白mei激活復(fù)合體亞基2ELISA試劑盒
人αL艾杜糖苷suanmei(IDUA) ELISA Kit	單核細胞巨噬細胞分化關(guān)聯(lián)蛋白ELISA試劑盒
人催乳su釋放激su(PRH)ELISA試劑盒	CXC趨化因子受體7ELISA試劑盒
人C型凝集su結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)試劑盒ELISA	大腸癌專一抗原4ELISA試劑盒
人脯氨suan羥化mei(PHD)檢測試劑盒elisa	表皮細胞活化肽因子ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)移生長因子α封閉多肽	豬水皰病毒(SVDV)核suan檢測試劑盒
磷suan化干擾su誘導(dǎo)的雙鏈RNA活化蛋白激mei封閉多肽	禽病毒性關(guān)節(jié)炎PCR檢測試劑盒
CD7封閉多肽	禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核suan檢測試劑盒
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6封閉多肽	副結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒
CD9蛋白封閉多肽	馬立克氏病病毒PCR試劑盒
雄激su受體封閉多肽	DU145人前列腺癌細胞病毒H5N1亞型PCR檢測試劑盒
溶質(zhì)載體家族39成員11封閉多肽	禽傳染性支氣管炎病毒793B型RT-PCR試劑盒
磷suan化絲裂原活化蛋白激mei3封閉多肽	馬立克氏病病毒2型PCR試劑盒
FBLIM1蛋白封閉多肽	馬可尼小囊蟲PCR試劑盒

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。