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當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> Jeko-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
| 貨號 | A01X799 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 英文名稱 | Jeko-1細(xì)胞 | 產(chǎn)品分類 | 人細(xì)胞系 |
| 實(shí)驗(yàn)類型 | 1640+10%FBS+1%P/S | 報(bào)告 | 提供STR鑒定報(bào)告 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
| 名稱 | JeKo-1 (人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
| 別稱 | Jeko-1; JEKO-1; JeKo 1; Jeko1; JEKO1; JEKO |
| 種屬 | 人類 |
| 年齡（性別） | 女性，78歲 |
| 組織來源 | 器官：外周血；組織：套細(xì)胞淋巴瘤 |
| 生長特性 | 懸浮細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 淋巴細(xì)胞樣 |
| 背景描述 | 一位套細(xì)胞淋巴瘤患者的巨細(xì)胞變種顯示白血病轉(zhuǎn)變，從其外周血單核細(xì)胞出發(fā)建立了MCL細(xì)胞株JeKo-1。JeKo-1細(xì)胞EB病毒陰性，并表達(dá)一種B細(xì)胞表型的IgM。JeKo-1細(xì)胞過表達(dá)cyclin D1、Bcl-2、c-Myc及Rb蛋白。Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR證實(shí)，JeKo-1細(xì)胞在SCID小鼠中高成瘤。 |
| 生物安全等級 | 1 |
| 生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S |
| 推薦傳代比例 | 3×10^5－2×10^6個(gè)/mL |
| 推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
| 倍增時(shí)間 | ~26-50小時(shí) |
| 凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
| 抗原表達(dá)情況 | CD3-, CD5+, CD10+, CD19+ (verified at ATCC) |
| 基因表達(dá)情況 | CD3-, CD5+, CD10+, CD20+ (verified at ATCC) |
| 保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-3006 DSMZ; ACC-553 |
細(xì)胞傳代：
1. Jeko-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
乳腺癌雌激su調(diào)控蛋白GREB1封閉多肽 | 嗜皮菌PCR檢測試劑盒 |
人免疫缺陷病毒1型M群E型RT-PCR試劑盒 | 多配體蛋白聚糖3ELISA試劑盒 |
人γ-半合成mei(γ-GCS)試劑盒ELISA | 電壓依賴性陰離子通道蛋白1ELISA試劑盒 |
人白介su28B(IL-28B)ELISA試劑盒 | 細(xì)胞角蛋白19片段抗原21-1ELISA試劑盒 |
人肌細(xì)胞生成su(MYOG)試劑盒elisa | 低分子量激肽原ELISA試劑盒 |
人單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒 | α乳清蛋白ELISA試劑盒 |
腫瘤抑制基因Testin封閉多肽 | 轉(zhuǎn)基因水稻TT-(BT)基因核suan檢測試劑盒 |
重組眼鏡蛇蛇毒蛋白 | 瘧原蟲PCR檢測試劑盒 |
CRB1蛋白封閉多肽 | 登革熱病毒通用型(DFV-U)核suan檢測試劑盒 |
中性粒細(xì)胞活性蛋白2/血小板堿性蛋白封閉多肽 | 輪狀病毒PCR檢測試劑盒 |
CXCL10趨化因子10/干擾su誘導(dǎo)蛋白10封閉多肽 | 梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒 |
TRAF2和NCK激mei相互作用蛋白封閉多肽 | Jeko-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞皮炎芽生菌PCR檢測試劑盒 |
細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2封閉多肽 | 帕臘南病毒RT-PCR試劑盒 |
FAM190B蛋白封閉多肽 | 梅毒螺旋體梅毒亞種PCR試劑盒 |
磷suan化腺苷單磷suan活化蛋白激meiβ1封閉多肽 | 毛樣枝孢霉PCR試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。
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