MEG-01人成巨核細胞白血病細胞-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	A01X849	規(guī)格	1×106
英文名稱	MEG-01細胞	產(chǎn)品分類	人細胞系
實驗類型	1640+10%FBS+1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	MEG-01 (人成巨核細胞白血病細胞)(STR鑒定正確)
別稱	Meg-01; MEG01; Meg01
種屬	人類
年齡（性別）	男性，55歲
組織來源	未知
生長特性	半貼半懸
細胞形態(tài)	淋巴母細胞樣
背景描述	MEG-01細胞源自一位CML患者成巨核細胞轉換期的骨髓細胞。細胞質因子Ⅷ和表面球蛋白Ⅱb/Ⅲa、高碘酸-Schiff(PAS)反應；α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性；髓過氧化物酶、α-丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。用單克隆抗體BA-1(抗B細胞、粒性白細胞)，HPL-3(抗球蛋白Ⅱb/Ⅲa)和20.3(抗單核細胞、血小板)染色成陽性，其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
生長培養(yǎng)基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:2-1:3
推薦換液頻率	2~3次/周
凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃

細胞傳代：

1. MEG-01人成巨核細胞白血病細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉染。

細胞轉染：

1. 轉染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。

UL16結合蛋白2封閉多肽	腸道致細胞病變人孤兒病毒PCR檢測試劑盒
粘質沙雷菌PCR試劑盒	二氫葉suan還原meiELISA試劑盒
人白介su1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒 ELISA	多胺調節(jié)因子1結合蛋白1ELISA試劑盒
人β-黑色su細胞刺激su(β-MSH)檢測試劑盒elisa	防御suβ127ELISA試劑盒
人抗風疹病毒IgM抗體(anti-RVIgM)ELISA試劑盒	端粒mei逆轉錄meiELISA試劑盒
人補體片段3d(C3d)試劑盒ELISA	S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白BELISA試劑盒
原癌基因蛋白c-kit封閉多肽	甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
G蛋白偶聯(lián)受體激mei相互作用蛋白1封閉多肽	牛皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒
Cy7標記的鏈霉親和su	豬圓環(huán)病毒型/豬圓環(huán)病毒型/偽狂犬病毒(PCV-/PCV-/PRV)核suan檢測試劑盒
智力發(fā)育調節(jié)相關蛋白BRWD3封閉多肽	破傷風桿菌PCR檢測試劑盒
DCN1樣蛋白3封閉多肽	摩氏摩根菌PCR試劑盒
骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1封閉多肽	MEG-01人成巨核細胞白血病細胞牛腺病毒型PCR檢測試劑盒
液泡蛋白分選蛋白33B封閉多肽	牛皰疹病毒通用PCR試劑盒
過量位點蛋白1封閉多肽	棉花源性成分PCR試劑盒
LETM1蛋白封閉多肽	摩氏摩根菌PCR試劑盒

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產(chǎn)生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。