SW48人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	A01X980	規(guī)格	1×106
英文名稱	SW48細(xì)胞	產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	DMEM+10%FBS+1%P/S	報(bào)告	提供STR鑒定報(bào)告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	SW480 [SW-480] (人結(jié)腸癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱	SW-480; SW 480; SW480E
種屬	人類
年齡（性別）	男性，50歲
組織來源	直腸；結(jié)直腸腺癌
生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
背景描述	SW480 [SW-480]細(xì)胞源自原位直腸腺癌，和SW620細(xì)胞源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。CSAp和直腸抗體3陰性；角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代。細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性，癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。SW480 [SW-480]細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞溶解酶，一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報(bào)道稱，SW480 [SW-480]細(xì)胞表達(dá)GM-CSF。SW480 [SW-480]細(xì)胞ras原癌基因的12位密碼子有一個(gè)突變，可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。1978年11月，A·Leibovitz將其提交給ATCC時(shí)已傳代至第91代。
生物安全等級(jí)	1
生長培養(yǎng)基	Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:2-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時(shí)間	~30-50小時(shí)
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，100% 溫度：37℃
致瘤性	Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
受體表達(dá)情況	epidermal growth factor (EGF)
基因表達(dá)情況	carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes.
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313 ECACC; 87092801

細(xì)胞傳代：

1. 試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. SW48人結(jié)腸腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。

血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物	腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測試劑盒
甲型流感（）病毒H9亞型RT-PCR試劑盒	糞卟啉原氧化meiELISA試劑盒
人補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)試劑盒ELISA	防御suβ125ELISA試劑盒
人Ephrin-B2(EFNB2)檢測試劑盒elisa	角化不良蛋白ELISA試劑盒
人血管性血友病因子/瑞斯托霉su輔因子(VWF)ELISA試劑盒	芳乙酰胺去乙酰化meiELISA試劑盒
人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體試劑盒ELISA	alpha-1能受體ELISA試劑盒
腦表達(dá)X連鎖蛋白4封閉多肽	彎曲桿菌PCR試劑盒
p21活化蛋白激meiARHG7封閉多肽	腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒
DNA甲基轉(zhuǎn)移mei1封閉多肽	奮森疏螺旋體PCR試劑盒
整合suαX封閉多肽	乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒
DNA結(jié)合抑制因子1封閉多肽	牛肺線蟲PCR試劑盒
鋅指蛋白186封閉多肽	SW48人結(jié)腸腺癌細(xì)胞腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒
6號(hào)染色體開放閱讀框72封閉多肽	耐青霉su肺炎鏈球菌PCR試劑盒
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激mei4封閉多肽	牛赤羽病毒RT-PCR試劑盒
泌乳升高蛋白1封閉多肽	牛附紅細(xì)胞體（牛嗜血支原體）PCR試劑盒