SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	A01X977	規(guī)格	1×106
英文名稱	SW-13細(xì)胞	產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	L15+10%FBS+1%P/S	報(bào)告	提供STR鑒定報(bào)告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	SW-13 (人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
種屬	人類
年齡（性別）	女性，55歲
組織來源	器官：腎上腺；組織：皮質(zhì)；腫瘤階段：Ⅳ級(jí)；疾?。涸l(fā)性小細(xì)胞癌
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
背景描述	SW-13細(xì)胞是于1971年8月從55歲的患有腎上腺皮質(zhì)癌的白人女性患者中分離建立的。該患者的病理診斷為Ⅳ級(jí)腎上腺皮質(zhì)原發(fā)性小細(xì)胞癌。電鏡顯示，SW-13細(xì)胞有許多球形縫隙連接(BGJ)。
生長(zhǎng)培養(yǎng)基	Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，100% 溫度：37℃

細(xì)胞傳代：

1. SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

白細(xì)胞介su1受體銜接蛋白封閉多肽	尼氏單孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒
禽副粘病毒通用RT-PCR試劑盒（暫停）	分泌粒蛋白ⅤELISA試劑盒
人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP) ELISA Kit	防御suβ121ELISA試劑盒
人Fc受體樣蛋白3(FCRL3)ELISA檢測(cè)試劑盒	動(dòng)力蛋白軸絲重鏈11ELISA試劑盒
人因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒	芳犬尿氨suan甲酰胺meiELISA試劑盒
人α(AMY1)試劑盒ELISA	Apelin
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激mei4封閉多肽	空腸彎曲桿菌PCR試劑盒
磷suan化微管相關(guān)蛋白封閉多肽	腦膜蠕蟲PCR檢測(cè)試劑盒
DNA復(fù)制解旋mei2樣封閉多肽	伽氏疏螺旋體PCR試劑盒
整合suβ1/Integrin β1封閉多肽	羊特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒
DNA修復(fù)蛋白R(shí)ad50封閉多肽	牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒
ADP核糖基化因子6封閉多肽	SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞腦心肌炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
紅細(xì)胞膜帶4.9蛋白封閉多肽	南非諾卡菌PCR試劑盒
磷suan化鈣調(diào)磷suanmeiA/鈣依賴磷suanmeiA封閉多肽	牛腸杯狀病毒RT-PCR試劑盒
細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1封閉多肽	牛分支桿菌卡介苗PCR檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。