NCI-H524人非小細胞肺癌細胞-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	A01X894	規(guī)格	1×106
英文名稱	NCI-H524細胞	產(chǎn)品分類	人細胞系
實驗類型	1640+10%FBS+1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	NCI-H524 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱	H524; H-524; NCIH524
種屬	人類
年齡（性別）	男性，63歲
組織來源	肺；源自轉(zhuǎn)移部位：淋巴結(jié)
生長特性	懸浮細胞
細胞形態(tài)	圓形
背景描述	NCI-H524細胞是于1982年建系，源自非小細胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
生物安全等級	1
生長培養(yǎng)基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1×10^5-1×10^6個/mL
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時間	~100小時
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
保藏機構(gòu)	ATCC; CRL-5831

細胞傳代：

1. NCI-H524人非小細胞肺癌細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

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變異鏈球菌PCR試劑盒	芳基硫suan酯meiIELISA試劑盒
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人Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒	橋粒芯糖蛋白4ELISA試劑盒
人類白細胞抗原A(HLA-A)elisa試劑盒	多萜醇磷suan-N-乙酰氨基葡萄糖磷suan轉(zhuǎn)移mei1ELISA試劑盒
人白介su37(IL-37)試劑盒ELISA	ICE蛋白mei激活因子ELISA試劑盒
致癌基因C-Myc封閉多肽	黃曲霉PCR試劑盒
醛固酮還原mei家族1成員C3封閉多肽	牛茨城病病毒PCR檢測試劑盒
DENND1A蛋白封閉多肽	腺病毒B型PCR試劑盒
脂肪酰還原mei2封閉多肽	人黏附分子-1基因K469E多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)
DIM-7蛋白封閉多肽	腦膜炎敗血金黃桿菌PCR試劑盒
配體依賴核受體共抑制因子封閉多肽	NCI-H524人非小細胞肺癌細胞牛呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒
mei原顆粒同源蛋白16B封閉多肽	牛腸道病毒RT-PCR試劑盒
信號識別顆粒封閉多肽	耐青霉su肺炎鏈球菌PCR試劑盒
軟骨蛋白聚糖封閉多肽	腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。