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兔子內皮抑素elisa檢測試劑盒說明書 兔子內皮抑素(ES)ELISA檢測試劑盒　英文簡稱：ESELISAKit　我司在保證產品質量的同時，以價格優(yōu)、到貨快、服務周到等優(yōu)點獲得了科研人士的*好評，我們致力于各種ELISA試劑盒、抗體、生物試劑等優(yōu)質科研產品的、銷售。竭誠為廣大科研用戶提供較全面，優(yōu)質，價格具優(yōu)勢的產品，免費為您提供全程技術指導，解決您的后顧之憂。,別名: 兔子內皮抑素(ES)ELISA試劑盒 產品規(guī)格:48T/96T。

實驗儀器：酶標儀、洗板機、離心機、培養(yǎng)箱等
試劑盒檢測：操作簡單、快速、敏感性高、特異性強
elisa規(guī)格：96T/48T
elisa原理：應用雙抗體夾心法測定標本中5-NT水平。
主要成分:酶標包被板、試劑、標準品等。
標本齊全：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等等。
操作流程示意：


兔子內皮抑素elisa檢測試劑盒說明書標本的采集及保存：
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 其它生物標本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
4. 樣本處理：血清或血漿標本推薦稀釋5,000倍。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：①標本因素；②試劑因素；③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。
1．樣品稀釋 酶聯(lián)免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋，不可避免會產生很強的非特異性反應，出現(xiàn)假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當的倍數，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現(xiàn)出來。一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定，以保證試驗的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴格按使用說明書操作，如某些產品應取10μl樣品進行稀釋，個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數不準確，檢測結果出現(xiàn)問題。
2．試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠，樣品孵育時間相對縮短，ELISA反應不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 
3．樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。
操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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Amylin,humanLys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2(Disulfide bridge:Cys2-Cys7)

Amyloid b//A4 Protein Precursor770 (586-595) (human, mouse, rat)Ile-Ser-Tyr-Gly-Asn-Asp-Ala-Leu-Met-Pro

Amyloid Bri Protein (1-23)Glu-Ala-Ser-Asn-Cys-Phe-Ala-Ile-Arg-His-Phe-Glu-Asn-Lys-Phe-Ala-Val-Glu-Thr-Leu-Ile-Cys-Ser (Disulfide bridge:Cys5-Cys22)

Amyloid Bri Protein (1-34)Pyr-Ala-Ser-Asn-Cys-Phe-Ala-Ile-Arg-His-Phe-Glu-Asn-Lys-Phe-Ala-Val-Glu-Thr-Leu-Ile-Cys-Ser-Arg-Thr-Val-Lys-Lys-Asn-Ile-Ile-Glu-Glu-Asn (Disulfide bridge: Cys5-Cys22)

Amyloid Bri Protein (1-34) (reduced)Pyr-Ala-Ser-Asn-Cys-Phe-Ala-Ile-Arg-His-Phe-Glu-Asn-Lys-Phe-Ala-Val-Glu-Thr-Leu-Ile-Cys-Ser-Arg-Thr-Val-Lys-Lys-Asn-Ile-Ile-Glu-Glu-Asn

Amyloid Bri Protein Precursor277 (89-106)Cys-Gly-Ile-Lys-Tyr-Ile-Lys-Asp-Asp-Val-Ile-Leu-Asn-Glu-Pro-Ser-Ala-Asp

Amyloid Dan Protein (1-34)Pyr-Ala-Ser-Asn-Cys-Phe-Ala-Ile-Arg-His-Phe-Glu-Asn-Lys-Phe-Ala-Val-Glu-Thr-Leu-Ile-Cys-Phe-Asn-Leu-Phe-Leu-Asn-Ser-Gln-Glu-Lys-His-Tyr (Disulfide bridge:Cys5-Cys21)

Amyloid Dan Protein (1-34) (reduced)Pyr-Ala-Ser-Asn-Cys-Phe-Ala-Ile-Arg-His-Phe-Glu-Asn-Lys-Phe-Ala-Val-Glu-Thr-Leu-Ile-Cys-Phe-Asn-Leu-Phe-Leu-Asn-Ser-Gln-Glu-Lys-His-Tyr

Amyloid P Component (33-38) amidePhe-Thr-Leu-Cys-Phe-Arg-NH2

Amyloid β//A4 Protein Precursor770 (667-676)Ser-Glu-Val-Lys-Met-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg

Amyloid β//A4 Protein Precursor770 (740-770)Ala-Ala-Val-Thr-Pro-Glu-Glu-Arg-His-Leu-Ser-Lys-Met-Gln-Gln-Asn-Gly-Tyr-Glu-Asn-Pro-Thr-Tyr-Lys-Phe-Phe-Glu-Gln-Met-Gln-Asn
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