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人甘露糖受體C1(MRC1)elisa定量檢測試劑盒的操作方法

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人甘露糖受體C1(MRC1)elisa定量檢測試劑盒  操作方法

1. 實驗前 20 分鐘從冰箱中取出試劑盒,以平衡至室溫(20-25℃);

2. 取出所需數(shù)量的板條,其余密封放回 4℃;

3. 建立標準曲線:設(shè)標準孔 8 孔,每孔中各加入樣品稀釋液 100ul,一孔加標準品 100nl,混勻后用加樣器吸出 100ul,移至第二孔。如此反復(fù)對倍稀釋至第七孔,,從第七孔中吸出 100ul 棄去,使之體積均為100ul。第八孔為空白對照;

4. 加樣:待測品孔中每孔加入待測樣品 100ul;

5. 將反應(yīng)板置 37℃120 分鐘;

6. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干;

7. 每孔中加入一抗體工作液 50ul;

8. 將反應(yīng)板充分混勻后置 37℃60 分鐘。

9. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干;

10. 每孔加酶標抗體工作液 100uL. 11. 將反應(yīng)板置 37℃60 分鐘。

12. 洗板:同前。

13. 每孔加入底物液 100uL,置 37℃暗處反應(yīng) 5-10 分鐘。

14. 每孔加入 50uL 終止液混勻。

15. 在 450nm 處測吸光值。(應(yīng)盡快,時間過長可能導(dǎo)致本底偏高)

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