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ELISA試劑盒
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抗體
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大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)條件選擇

時(shí)間:2017-12-20閱讀:69
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大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)條件選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
大鼠elisa試劑盒大鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒    ,英文名:    COX-2 ELISA Kit
大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    COX-1 ELISA Kit
大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒    ,英文名:    CsA ELISA Kit
大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒    ,英文名:    Alox5 ELISA Kit
大鼠花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒    ,英文名:    AA ELISA Kit
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒    ,英文名:    EPOR ELISA Kit
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒    ,英文名:    EPO ELISA Kit
大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒    ,英文名:    sm Actinin-α ELISA Kit
大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒    ,英文名:    MC Ab ELISA Kit
大鼠核轉(zhuǎn)錄因子κBP65(NFκBp65)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFκBp65 ELISA Kit
大鼠核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFκB ELISA Kit
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒    ,英文名:    IKBα ELISA Kit
大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒    ,英文名:    NF-κB p65 ELISA Kit
大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒    ,英文名:    NF-κB p65 ELISA Kit
大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒    ,英文名:    RANKL ELISA Kit
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒    ,英文名:    NF-κB ELISA Kit
大鼠和肽素(copeptin)ELISA試劑盒    ,英文名:    copeptin ELISA Kit
大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒    ,英文名:    Tie-2 ELISA Kit大鼠elisa試劑盒

 

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