當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>細(xì)胞周期同位素標(biāo)記法測定原理
標(biāo)記有絲分裂百分率法 (PLM) 是一種常用的測定細(xì)胞周期時間的方法。其原理是對測定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞,通過統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來測定細(xì)胞周期。
測定原理:
① 待測細(xì)胞經(jīng) 3H- 胸腺嘧啶核苷標(biāo)記后,所有 S 期細(xì)胞均被標(biāo)記。
② S 期細(xì)胞經(jīng) G2 期才進(jìn)入 M 期,所以一段時間內(nèi) PLM = 0。
③ 開始出現(xiàn)標(biāo)記 M 期細(xì)胞時,表示處于 S 期最后階段的細(xì)胞,已渡過 G2 期,所以從 PLM = 0 到出現(xiàn) PLM 的時間間隔為 G2期的持續(xù)時間。
④ S 期細(xì)胞逐漸進(jìn)入 M 期,PLM 上升,到達(dá)到最高點(diǎn)的時候說明來自處于 S 最后階段的細(xì)胞,已完成 M,進(jìn)入 G1 期。所以從開始出現(xiàn) M 到 PLM 達(dá)到最高點(diǎn) (≈ 100%) 的時間間隔就是 M 期的持續(xù)時間。
⑤ 當(dāng) PLM 開始下降時,表明處于 S 期最初階段的細(xì)胞也已進(jìn)入 M 期,所以出現(xiàn) LM 到 PLM 又開始下降的一段時間等于 S 期的持續(xù)時間。
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