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細胞傳代密度問題與解決方案

時間:2023/10/8閱讀:1074
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細胞傳代密度問題與解決方案:

1.傳代密度過高

一旦細胞養(yǎng)太久至融合度過高(>90%)才傳代,容易使細胞產(chǎn)生老化現(xiàn)象,甚至是堆疊,再消化細胞時不易吹打成單顆細胞,即便再重新鋪盤傳代,細胞也無法回到原本的特性了。(如:單層細胞,沒長滿就發(fā)生堆疊現(xiàn)象)

解決方案:

盡量避免融合度過高,鏡下觀察融合度約達到80%即可傳代分盤。

細胞融合度:在細胞培養(yǎng)中指的是細胞在培養(yǎng)表面(培養(yǎng)皿/瓶)所占的比例。

2.傳代密度過低

哺乳動物貼壁培養(yǎng)細胞,若細胞培養(yǎng)到80-90%密度需要開始傳代,在傳代接種細胞密度過低,細胞間距離太遠,就無法在細胞間產(chǎn)生黏附及通信作用,幫助信號傳導(dǎo)并活化細胞;總體細胞量不足,分泌的生長因子濃度會不足以產(chǎn)生利于生長的微環(huán)境,以上皆會造成增殖速度遲緩或細胞死亡。

解決方案:

細胞傳代時,要進行準確的細胞計數(shù),確保鋪盤的密度。


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