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其他類(lèi)ELISA試劑盒試驗(yàn)步驟:
1.試劑耗材預(yù)備;
2.取新鮮動(dòng)物安排;
3.酶消化;
4.過(guò)濾網(wǎng)挑選、別離細(xì)胞;
5.加培育液,37℃、5%CO2培育;
6.傳代;
7.凍存;
8.復(fù)蘇。
其他類(lèi)ELISA試劑盒保存方法:
一、要留心避免呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,因此,在以HRP為符號(hào)酶的ELISA試劑盒測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
二、樣本的搜集及血清別離中要留心盡量避免細(xì)jun污染,一則細(xì)jun的成長(zhǎng),其所排泄的一些酶或許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分解效果;二則一些細(xì)jun的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定辦法發(fā)生非特異性干擾。
三、血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,小鼠ELISA試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。
四、冰凍保存的血清標(biāo)本須留心避免因停電等構(gòu)成的重復(fù)凍融。ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性效果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留心,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。
五、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)jun污染所構(gòu)成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心堆積后取上清檢測(cè)。Elisa實(shí)驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)確診辦法。由于其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡(jiǎn)練,效果判斷較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗(yàn)的各領(lǐng)域中。(內(nèi)容僅供參考)
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