環(huán)孢素A（CsA）elisa定量檢測試劑盒  操作步驟

1.加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔、空白孔。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔 7 孔，依次加入 100μL 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 （見試劑準(zhǔn)備 2）?？瞻卓准?100μL（見試劑準(zhǔn)備第二步*后一管），余孔加待測樣品 100μL，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃ 溫育 2 小時(shí)。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。

3.每孔加檢測溶液 A 工作液 100μL（臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時(shí)。

4.棄去孔內(nèi)液體，每孔用 300μL 的洗滌液洗滌，浸泡 1-2 分鐘，吸去 （不可觸及板壁） 或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次 （也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干），重復(fù)洗板 3 次。*后一次洗滌后，要把孔內(nèi)的洗滌液*甩干。自動(dòng)洗板機(jī)亦可。

5.每孔加檢測溶液 B 工作液 （臨用前配制）100μL，加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時(shí)。

6.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 5 次，方法同步驟 4。

7.每孔加底物溶液 90μL，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃ 避光顯色 （反應(yīng)時(shí)間控制在 15-25 分鐘，不要超過 30 分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色，后 3-4 孔梯度不明顯時(shí)，即可終止）。

8.每孔加終止溶液 50μL，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現(xiàn)顏色不勻一，請(qǐng)輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板以使溶液混合均勻。

9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 （O.D. 值）。

環(huán)孢素A（CsA）elisa定量檢測試劑盒  儲(chǔ)存方式

標(biāo)本的采集與保存：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。