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進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟

時(shí)間:2017/11/6閱讀:357
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進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說(shuō)10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng)
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。、
進(jìn)口elisa試劑盒人血吸蟲(chóng)抗體(IgM)免疫試劑盒    Human schistosoma haematobium antibody IgM ELISA kit
人血吸蟲(chóng)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human schistosoma haematobium antibody IgG ELISA kit
人血吸蟲(chóng)(SH)抗體免疫試劑盒    Human schistosoma haematobium(SH)antibody ELISA kit
人血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒    Human Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
人血栓素A2合成酶(TX-A2)免疫試劑盒    Human Thromboxane-A2 Synthase(TX-A2 Synthase)ELISA Kit
人血栓素A2(TX-A2)免疫試劑盒    Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit
人血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒    Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白P(SAP)免疫試劑盒    Human SAP ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)免疫試劑盒    Human SAA4 ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)免疫試劑盒    human SAA3 ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒    Human SAA ELISA Kit
人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)免疫試劑盒    Human SDPR ELISA Kit
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)免疫試劑盒    human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,SGK2 ISA KIT
人血漿抗凝蛋白S(PS)免疫試劑盒    Human PS ELISA Kit
人血漿激肽釋放酶(KLKB1)免疫試劑盒    Human plasma kallikrein,KLKB1 ELISA kit
人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒    Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
人血紅素氧合酶2(HO-2)免疫試劑盒    Human heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit
人血紅素氧合酶1(HO-1)免疫試劑盒    Human heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit
人血紅蛋白β亞基(HB-β)免疫試劑盒    Human HB-β ELISA Kit
人血紅蛋白α亞基(HB-α)免疫試劑盒    Human α-subunits of hemoglobin,HB-α ELISA Kit
人血紅蛋白H(HbH)免疫試劑盒    Human Hemoglobin H,HbH ELISA Kit
人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒    Human Hemoglobin C,HbC ELISA Kit
人血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒    Human Hemoglobin,Hb ELISA Kit
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒    Human angiostatin,ANG ELISA Kit
人血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試劑盒    Human ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit進(jìn)口elisa試劑盒

 

 

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