進口elisa試劑盒臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗，是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點，因此被臨床醫(yī)生廣為認可，已廣泛應用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。多聚酶鏈式反應的原理類似于DNA的天然復制過程。
在待擴增的DNA片段兩側(cè)和與其兩側(cè)互補的兩個寡核苷酸引物，經(jīng)變性、退火和延伸若干個循環(huán)后，DNA擴增2n倍。
1.變性:加熱使模板DNA在高溫下(94℃)變性，雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈，即變性階段。
2.退火:使溶液溫度降至50-60℃，模板DNA與引物按堿基配對原則互補結(jié)合，即退火階段。
3.延伸:溶液反應溫度升至72℃，耐熱DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導下，利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)，按5'→3'方向復制出互補DNA，即引物的延伸階段。
進口elisa試劑盒上述3步為一個循環(huán)，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個階段。從理論上講，每經(jīng)過一個循環(huán)，樣本中的DNA量應該增加一倍，新形成的鏈又可成為新一輪循環(huán)的模板，經(jīng)過25-30個循環(huán)后DNA可擴增106-109倍。典型的PCR反應體系由如下組分組成:DNA模板、反應緩沖液、dNTP、兩個合成的DNA引物、耐熱Tag聚合酶。
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白        dNTP 和引物清除劑    100 次
D- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ( 標記 )    0.5mL
L- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ,10mM    0.5mL
L- 精氨酸鹽酸鹽        dNTP 溶液 ,10mM    5mL
L- 精氨酸        dNTP 溶液，100mM     0.5mL
抗壞血酸        dNTP 溶液，100mM     5mL
L- 天門冬酰胺        dNTP 溶液，2.5mM    0.5mL
L- 天門冬氨酸        dNTP 溶液，2.5mM    5mL
金精三羧酸        DOP-PCR 試劑盒    50 次
金胺 O        Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素    100μL
親和素        DpnI    500U
8- 氮雜鳥嘌呤        DTT，蛋白    5g
桿菌肽        DTT，免稱量蛋白    48 管
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