進(jìn)口elisa試劑盒臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)，是專門用來(lái)檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過(guò)將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門的禽疫病診斷。多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程。
在待擴(kuò)增的DNA片段兩側(cè)和與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩個(gè)寡核苷酸引物，經(jīng)變性、退火和延伸若干個(gè)循環(huán)后，DNA擴(kuò)增2n倍。
1.變性:加熱使模板DNA在高溫下(94℃)變性，雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈，即變性階段。
2.退火:使溶液溫度降至50-60℃，模板DNA與引物按堿基配對(duì)原則互補(bǔ)結(jié)合，即退火階段。
3.延伸:溶液反應(yīng)溫度升至72℃，耐熱DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導(dǎo)下，利用反應(yīng)混合物中的4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)，按5'→3'方向復(fù)制出互補(bǔ)DNA，即引物的延伸階段。
進(jìn)口elisa試劑盒上述3步為一個(gè)循環(huán)，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個(gè)階段。從理論上講，每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，樣本中的DNA量應(yīng)該增加一倍，新形成的鏈又可成為新一輪循環(huán)的模板，經(jīng)過(guò)25-30個(gè)循環(huán)后DNA可擴(kuò)增106-109倍。典型的PCR反應(yīng)體系由如下組分組成:DNA模板、反應(yīng)緩沖液、dNTP、兩個(gè)合成的DNA引物、耐熱Tag聚合酶。
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白        dNTP 和引物清除劑    100 次
D- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )    0.5mL
L- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ,10mM    0.5mL
L- 精氨酸鹽酸鹽        dNTP 溶液 ,10mM    5mL
L- 精氨酸        dNTP 溶液，100mM     0.5mL
抗壞血酸        dNTP 溶液，100mM     5mL
L- 天門冬酰胺        dNTP 溶液，2.5mM    0.5mL
L- 天門冬氨酸        dNTP 溶液，2.5mM    5mL
金精三羧酸        DOP-PCR 試劑盒    50 次
金胺 O        Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素    100μL
親和素        DpnI    500U
8- 氮雜鳥(niǎo)嘌呤        DTT，蛋白    5g
桿菌肽        DTT，免稱量蛋白    48 管
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