從21世紀(jì)初期，ELISA試劑盒因?yàn)槊庖邔W(xué)研究中一個(gè)十分活躍的范疇就是細(xì)胞因子的研究，它的檢測(cè)成為現(xiàn)代生物科學(xué)研究的重要方面。國(guó)內(nèi)搶先的生物廠家，運(yùn)用抗原、抗體反響的原理已研發(fā)出了高靈敏度（sensitive）、高特異性、高度配套的細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒，出產(chǎn)的檢測(cè)試劑盒包括簡(jiǎn)直一切的細(xì)胞因子。根據(jù)檢測(cè)辦法不同，可分為ELISA測(cè)定（酶聯(lián)免疫）和放射免疫測(cè)定。
1. 放射免疫測(cè)定
放射免疫測(cè)定是將同位素剖析的高靈敏度與抗原抗體反響的特異性相結(jié)合，辦法大多選用競(jìng)賽法原理。待檢的細(xì)胞因子與放射性同位素符號(hào)的細(xì)胞因子競(jìng)賽與細(xì)胞因子抗體（多克隆抗體或單克隆抗體）結(jié)合，再經(jīng)過(guò)別離劑別離結(jié)合狀態(tài)的符號(hào)物，計(jì)數(shù)后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出細(xì)胞因子的量。本法具有靈敏度高（可檢測(cè)出ng乃至pg水平），特異性強(qiáng)、性好等特色。
2.ELISA試劑盒測(cè)定
2-1.酶聯(lián)免疫斑駁（ELISPOT） 檢測(cè)試劑盒是根據(jù)定量夾心ELISA法原理，將影響后的細(xì)胞滴加到包被在貼PVDF微孔中，放置于37℃孵育。在孵育的進(jìn)程中，細(xì)胞排泄的細(xì)胞因子即會(huì)被包被的抗體所捕獲，以下的進(jìn)程與一般的ELISA試驗(yàn)相同，zui終用不溶性的酶聯(lián)底物進(jìn)行顯色，每一個(gè)顯色點(diǎn)（斑駁）既代表一個(gè)排泄細(xì)胞因子的細(xì)胞。經(jīng)過(guò)的ELISPOT剖析儀或在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)，就可以進(jìn)行剖析。ELISPOT法用于檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞排泄的細(xì)胞因子，綜合了一般ELISA辦法的高特異性和定量的長(zhǎng)處，并且具有生物活性剖析得出與功用相關(guān)的成果的長(zhǎng)處。
2-2.雙抗夾心ELISA法 雙抗體夾心法需制備針對(duì)細(xì)胞因子不同位點(diǎn)的兩個(gè)單克隆抗體，一個(gè)抗體作為固相抗體用于包被，另一個(gè)作為符號(hào)抗體?？蛇x用慣例雙抗夾心法，也可選用一步法。因?yàn)檠逯屑?xì)胞因子的含量很低。慣例ELISA法不能滿足要求，需引入*－親合素體系來(lái)進(jìn)步靈敏度，即參加樣品后參加*符號(hào)的另一個(gè)抗體，再參加親合素及*化的酶，再參加底物進(jìn)行顯色，顏色與待檢的細(xì)胞因子量呈正比
三、ELISA試劑盒檢測(cè)細(xì)胞因子的優(yōu)缺陷
A. 長(zhǎng)處
1.特異性強(qiáng)，這是符號(hào)免疫技能的共同特色。
2.運(yùn)用簡(jiǎn)潔，省時(shí)。
3.重復(fù)性好，影響要素少，試驗(yàn)成果安穩(wěn)。
B. 缺陷
1.測(cè)定的是蛋白的含量而不是生物學(xué)活性。
2.檢測(cè)的靈敏度不如生物學(xué)活性法。
3.因?yàn)楦鱾€(gè)試驗(yàn)室制備的抗體不同，同一樣品用不同ELISA試劑盒檢測(cè)的成果也不一樣，試驗(yàn)室之間難以進(jìn)行質(zhì)量操控
會(huì)員1.png)