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技術(shù)文章

處理ELISA試劑盒的方發(fā)法

閱讀:271發(fā)布時(shí)間:2017-5-15

做elisa試驗(yàn)樣本的處理及請(qǐng)求:
1.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖刷組織,去掉殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響丈量成果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(通常按1:9的分量體積比,比方1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,詳細(xì)體積可根據(jù)試驗(yàn)需求恰當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中參加蛋白酶抑制劑)參加玻璃勻漿器中,于冰上充沛研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或重復(fù)凍融。zui終將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢查。
2.血清:將搜集于血清別離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保留,但應(yīng)防止重復(fù)凍融。
3.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑收集標(biāo)本,并將標(biāo)本在收集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢查,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保留,但應(yīng)防止重復(fù)凍融。
4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,取上清即可檢查,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保留,但應(yīng)防止重復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui終檢查成果,因而溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢查。

 


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