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技術(shù)文章

ELISA試劑盒浸泡式洗刷方法流程

閱讀:199發(fā)布時間:2017-1-6

ELISA試劑盒浸泡式洗刷方法流程
吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
浸泡,即將洗刷液注滿板孔,放置1-2 分鐘,間歇搖晃,浸泡時間不行隨意縮短;
開始用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來水。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。
重復(fù)操作c 和d,洗刷3-4次(或按說明規(guī)則)。
在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時間。
ELISA試劑盒聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的聯(lián)絡(luò)是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán),ELISA試劑盒也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵聯(lián)絡(luò),然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的聯(lián)絡(luò),并借助于親水基團(tuán)和水分子的聯(lián)絡(luò)效果,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液情況,然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑通常是吐溫 20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低實驗的靈敏度。
洗刷時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗刷效果更佳。
洗刷時附接一格外設(shè)備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,繼續(xù)沖刷 2 分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2 分鐘,吸干即可。
浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷效果更為*,且也簡練、迅速。
ELISA試劑盒實驗標(biāo)明,流水沖刷式一樣也適用于微量滴定板的洗刷。


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