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ELISA試劑盒的蛋白質(zhì)局部濃縮

時(shí)間:2018-4-4閱讀:258
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ELISA試劑盒蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。
 
ELISA試劑盒為您詳解樣品的各步操作方法:
A、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
B、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。
C、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,使用不含熱原的試管,收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
D、組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。
E、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,盡可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、ELISA試劑盒收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧,以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。

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