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你都清楚ELISA實(shí)驗(yàn)的這三條基本原理嗎?

時(shí)間:2017-10-20閱讀:145
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ELISA試劑盒是免疫確診中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的盛行癥、寄生蟲病及非盛行癥等方面的免疫確診。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)現(xiàn)已運(yùn)用的作用,認(rèn)為ELISA法具有活絡(luò)、特異、簡略、快速、安穩(wěn)及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不只適用于標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清盛行學(xué)查詢。本法不只可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種前期確診的出色方法。
1、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分彼此吸附,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;
2、抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3、酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯現(xiàn)試驗(yàn)作用。
 由于ELISA試劑盒一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因此,具有特異性。而另一方面又由于酶符號(hào)抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)作反應(yīng),發(fā)作擴(kuò)展作用,正由于此種擴(kuò)展作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA試劑盒是一種既敏感又特異的方法。
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