ELISA試劑盒制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。
如有細菌污染,菌體中或許富含內源性HRP,也會發(fā)作假陽性反應。
如在冰箱中保留過久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
ELISA的操作因固相載體的構成不一樣而有所區(qū)別,國內醫(yī)學查驗通常均用板式點。
除特殊情況外,在醫(yī)學查驗中均以血清作為檢查標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。
有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如大便和某些分泌物)。
血清標本可按常規(guī)辦法收集,應留心防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本或許會增加非特異性顯色。
在5天內測定的血清標本可放置于4℃,跨越一星期測定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒血清標本宜在新鮮時檢查。
凍住血清融解后,蛋白質有些濃縮,散布不均,應充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上激烈振動。
混濁或有堆積的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢查。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。
重復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保留作多次檢查,宜少量分裝冰存。
本次實驗不需用的有些應及時放回冰箱保留。
按試劑盒說明書的央求準備實驗中需用的試劑。
ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包含用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。
大多數ELISA檢查均以血清為標本。從冰箱中取出的實驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。
血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,別的成份均對等于血清。
ELISA試劑盒保留血清自收集時就應留心無菌操作,也可參與恰當防腐劑。
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