在LISA試劑盒試驗中各種酶標儀功能都會有所不同，所以在運用中應(yīng)詳細閱覽說明書，再進行下一步操作。
自從20世紀60-70年代問世以來，ELISA試劑盒法得到*科研工作者的認可及推崇，在歐美及我國取得很大的推行，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。ELISA試劑盒有著性高、靈敏度高、特異性強等許多的優(yōu)點，它在檢查抗體、抗原等方面有*的使用，深受廣闊用戶朋友的喜歡。然而，在試驗過程中，也需求留意許多疑問，特別是顯色、比色疑問。
顯色是ELISA試劑盒中的zui終一步溫育反響，此刻酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)品。反響的溫度和時刻仍是影響顯色的要素。在必定時刻內(nèi)，陰性孔可堅持無色，而陽性孔則隨時刻的延伸而呈色加強。恰當(dāng)進步溫度有助于加快顯色進行。在定量測定中，參加底物后的反響溫度和時刻應(yīng)按規(guī)則力求。定性測定的顯色可在室溫進行，時刻通常不需求嚴格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色恰當(dāng)縮短或延伸反響時刻，及時判別。
ELISA試劑盒OPD（鄰苯二胺）底物顯色通常在室外溫或37℃反響20-30分鐘后即不再加深，再延伸反響時刻，可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色，顯色反響應(yīng)避光進行，顯色反響結(jié)束時參加停止液停止反響。OPD產(chǎn)品用硫酸停止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB（四甲基聯(lián)苯胺）受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺上，邊反響調(diào)查成果。但為確保試驗成果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)則的恰當(dāng)時刻閱覽成果。TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達高峰，隨即逐步削弱，至2小時后即可*衰退至無色。TMB的停止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反響停止。這類停止劑尚能使藍色保持較長時刻（12-24小時）不褪，是目視判別的杰出停止劑。此外，各類酸性停止液則會使藍色轉(zhuǎn)變成黃色，此刻可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。