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近年來,隨著磁珠法核酸提取技術的不斷完善與進步,配套的全自動核酸提取儀同樣也得到了快速發(fā)展。由于這項技術的便捷、快速、無污染,同時自動化程度較高,廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業(yè)和分子生物學研究等多種領域。核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。大型自動液體工作站因為設備成本高昂,運行成本高,適合一次提取幾千個同一種類標本,所以得到應用的比較少;而小型自動化的儀器,因為儀器設備和運行成本低,操作方便得到越來越多的應用。
面對市場上五花八門的同類型產(chǎn)品,如何選擇一款適合自己核酸提取儀,尤其是對于那些有自己試劑體系的終端客戶,采取哪些方式或步驟驗證一臺全自動核酸提取儀的優(yōu)劣,就顯得尤為重要。本文以洛陽吉恩特生物科技有限公司生產(chǎn)的32通道全自動核酸提取儀為例,整理出儀器鑒定、調(diào)試流程的通用方案,供使用者參考。
一、儀器外觀與操作界面
儀器外觀因個人喜好而定,當然不同品質(zhì)的外觀,因選材及做工的差異成本相差較大。操作界面同樣因人而異,各有所好??紤]到生物樣本的多樣性、及實驗中突發(fā)情況的應急處理,在此著重提出兩項功能供客戶參考。
A:強力吸附模式(通過分段磁吸和循環(huán)磁吸等磁棒運動模式可適用各種樣本,尤其是那些粘稠樣本,極大地提高了磁珠的吸附效率,避免因孔內(nèi)液體粘稠造成的磁珠損失,從而導致實驗失?。?;
B:斷電程序記憶功能:突然停電的情況下系統(tǒng)會自動保存正在運行中的程序以及運行進度,下次開機時會自動提醒客戶是否要繼續(xù)之前的程序。避免電力系統(tǒng)突然故障造成的實驗失敗及珍貴樣本的損失。
二、儀器的開機檢查
儀器經(jīng)過長途運輸顛簸震蕩,對于儀器的做工、品質(zhì)、及穩(wěn)定性等各方面要求較高,客戶取出儀器后可通過放耗材設置一個簡短的運行程序,來初步判斷儀器的系統(tǒng)參數(shù)是否需要調(diào)整。觀察:磁棒套在每個孔位時候位于中心位置,磁吸停位點是否過高等等,發(fā)現(xiàn)有觸壁,撞擊底部等現(xiàn)象應及時暫停儀器調(diào)整系統(tǒng)參數(shù)。(簡短程序需要使得儀器在深孔板的每個孔位都要進行一次震蕩、磁吸、轉(zhuǎn)移)
三、實驗驗證核酸提取儀孔位間磁珠回收效率是否有所差異
深孔板的一、七列加入適量磁珠與純水,其他列均加入純水,程序設置為磁珠經(jīng)過攪拌震蕩、磁吸、轉(zhuǎn)移從一列經(jīng)過第二、三、四、五,轉(zhuǎn)移到第六列,實驗完畢后觀察一、二、三、四、五列有無磁珠殘留,如果個別孔位有明顯磁珠殘留,應與廠家溝通。
四、核酸提取儀性能的檢驗
對于那些有自己試劑體系的客戶而言,如何確定自己的試劑體系是否與核酸提取儀兼容才是客戶關心的問題。吉恩特生物通過多年的經(jīng)驗積累,總結(jié)出了一套有效的實驗方法,供使用者參考。
①首先驗證核酸提取儀的回收效率以及孔間差
采用已知濃度的核酸樣本進行核酸回收純化,因為核酸純化試劑盒的成分單一,試驗流程短,耗時較短,便于發(fā)現(xiàn)問題進行及時調(diào)整。而且核酸樣本的濃度、比值固定,通過回收實驗能夠極大的反應出一臺核酸提取儀的工作效率,同時通過觀察數(shù)據(jù)可以分析出核酸提取儀的孔間差異,如果經(jīng)過幾次這樣的純化回收實驗發(fā)現(xiàn)有某個固定孔位純化效率異常,就需要及時與廠家溝通。
②進行全血DNA提取實驗
全血成分復雜,有一定的粘稠度,基因組大,磁珠與基因組結(jié)合時容易形成絮狀,磁珠法提取時對儀器精密度要求較高,通過全血基因組DNA提取能夠有效的反映出核酸提取儀的整體協(xié)調(diào)程度與提取效率。
五、技術參數(shù)
處理體積:20ul-1000ul
樣品通量:1-32
回收效率:>98%
孔間差異:CV<5%
加熱溫度:室溫-120℃
震蕩混合:多檔、多模式
消毒方式:內(nèi)置紫外消毒模塊
試劑種類:通用磁珠法試劑盒
操作系統(tǒng):GOS 1.0
操作界面:大尺寸液晶觸控
接口方式:USB、藍牙、Wifi接口
程序管理:新建、編輯、刪除模式程序,自由靈活編輯提取程序
外形尺寸:40cm*42cm*48cm
機器重量:25kg
電源配置:AC110~240V 50Hz/60Hz
六、訂購信息
名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
全自動核酸提取儀 | GNT32 | 32通道 |
GNT32E | 32通道 |
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