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O157顯色培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2017-12-16 09:36:56瀏覽次數(shù):195次

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O157顯色培養(yǎng)基用途:用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色

O157顯色培養(yǎng)基H7顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中O157H7菌的快速檢測(cè)。O157H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基。 
成份 (g/L)


特殊營養(yǎng)物質(zhì)

 68.4 

混合顯色劑

2.6

瓊脂

15.0

pH 7.0 ± 0.1 25 ℃

CT 添加劑 1ml/ 支 *5 
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。 
O157顯色培養(yǎng)基注意 
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。 
用法 
稱取本品 17.2g加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱2分鐘左右。冷卻至 45-50 ℃時(shí),加入 CT 添加劑混勻,
傾入無菌平皿。 
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36±1℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。 
貯存 
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。 
失效 
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。 
操作步驟 
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液; 
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC 肉湯或 mTSB 肉湯中, 36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí);

3 、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到 O157 菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個(gè)平板;

4 、 36±1 ℃培養(yǎng) 18-24h , O157:H7 菌顯亮紅色,淡紅色或紅色 ,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈 大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色, 其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色; 
5 、對(duì)典型菌落可做 O157:H7 菌血清學(xué)試驗(yàn)和全套生化試驗(yàn)。 
 注:必須在 36±1℃ 培養(yǎng) 24 小時(shí)內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。 
質(zhì)量控制 
1 、外觀 
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈淡藍(lán)色。制備好的平板呈藍(lán)色色固體培養(yǎng)基。 
2 、微生物試驗(yàn) 
在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18-24h 小時(shí):


質(zhì)控菌株

ATCC

生長(zhǎng)情況

菌落顏色

大腸桿菌 O157

35150

+++

亮紅色 

*

25923

-/+

黃色 或無色

大腸桿菌

25922

+++

暗藍(lán)色,菌落周圍有暈圈

沙門氏菌

14028

+++

藍(lán)色

奇異變形桿菌

12453

+/-

無色

方法的局限性 
本培養(yǎng)基對(duì)典型大腸桿 O157:H7 必須做血清學(xué)試驗(yàn)或生化試驗(yàn)。 
典型特征 
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色; 

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