本試劑僅供研究使用 標本：組織勻漿
試驗原理：
Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Dopamine濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Dopamine和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關系。
試劑盒內容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存） | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶標板 | 1塊板（96T） | 半塊板（48T） | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標準品：1600ng/L | 1瓶（0.6ml） | 1瓶（0.3ml） | 按說明書進行稀稀 |
空白對照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | 即用型 |
標準品稀釋緩沖液 | 1瓶（5ml） | 1瓶（2.5ml） | 即用型 |
*標記的抗Dopamine抗體 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶（10ml） | 1瓶（5.0ml） | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
標本稀釋液 | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） | 即用型 |
自備材料
- 蒸餾水。
- 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
- 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
- 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
- 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
- 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
- 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
- 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
- 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
- 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
- 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
- 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
- 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
- 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
- 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
- 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
- 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
- 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
- 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
- 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
