培養(yǎng)基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質,用人工的方法配制而成的用于培養(yǎng)微生物的營養(yǎng)基質。培養(yǎng)基種類很多,不同的微生物所需培養(yǎng)基不同。就培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的來源可分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基特殊用途可分加富培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入1.5 %-2.0 %瓊脂作凝固劑; 半固體培養(yǎng)基則加入0.5 %-0.8 %的瓊脂。
一般培養(yǎng)基除含有大量水分外, 還含有碳素、氮素、無機鹽類和維生素等。此外, 由于徽生物生長繁殖必須在zui適的酸堿度范圍內(nèi), 才能表現(xiàn)出zui大的生命活力, 因此應根據(jù)不同種類的徽生物. 將培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到一定的pH值范圍。
培養(yǎng)基配制后還必須進行滅菌, 滅菌是指殺死或消滅所有微生物, 包括營養(yǎng)體、孢子和芽孢。滅菌的方法很多,可分為物理方法與化學方法兩大類。物理方法包括濕熱滅菌、干熱滅菌、紫外線滅菌、過濾除菌等; 化學方法主要是利用化學藥品對接種室空間、用具和其它物體表面進行滅菌與消毒。消毒一般是指消滅有害微生物的營養(yǎng)體和病原菌。
(一) 培養(yǎng)基的配制方法
l. 按照配方的組分及用量先分別稱量并配成液體;
2. 根據(jù)要求調(diào)到一定的酸堿度(pH值);
3. 若要制成固體則加入2%瓊脂并加熱融化;
4. 根據(jù)需要的數(shù)量分裝入試管或三角瓶中, 加上棉塞或蓋上紗布;
5. 包扎好滅菌后備用。
(二) 培養(yǎng)基及常用器皿的滅菌
培養(yǎng)微生物常用的玻璃器具主要有試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、吸管等, 在使用前必須*行滅菌, 使容器中不含任何雜菌;培養(yǎng)微生物用的營養(yǎng)基質(培養(yǎng)基), 在接入純種前也必須先行滅菌, 使培養(yǎng)基呈無菌狀態(tài)。培養(yǎng)基可分裝入器皿中一起滅菌, 也可在單獨滅菌后以無菌操作分裝入無菌的器皿中。
注:1. 棉塞制作與器皿包扎。
2. 培養(yǎng)基與器皿的高壓蒸汽滅菌。
3. 玻璃器皿的干熱滅菌。