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免疫組化試劑盒的定義

時(shí)間:2014/11/28閱讀:600
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免疫組化試劑盒用于體外診斷。Histostain®-Plus試劑盒用于檢測(cè)與人體組織或細(xì)胞標(biāo)本。免疫組化試劑盒適用范圍為冰凍切片和石蠟包埋組織切片,新準(zhǔn)備好的淋巴細(xì)胞,和固定的培養(yǎng)細(xì)胞。

六大特點(diǎn):

1.簡(jiǎn)易:以簡(jiǎn)單的一步反應(yīng)取代常規(guī)法的五個(gè)步驟。

2.快捷:以1個(gè)小時(shí)取代常規(guī)法的3-5 個(gè)小時(shí)。

3.通用:適合于絕大多數(shù)一級(jí)抗體,而且不需要二級(jí)抗體反應(yīng)。

4.靈敏:具有與常規(guī)法相似的靈敏度。

5.重現(xiàn)性好:實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性好。

6.經(jīng)濟(jì):抗體和試劑可重復(fù)使用 4-5次。

SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細(xì)胞中抗原分布的簡(jiǎn)便而敏感的免疫組化染色方法。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,其比直接酶標(biāo)二抗敏感5-10倍,是免疫組化的理想方法。

基本原理:SABC是鏈霉親和素-*-酶(或者FITC)復(fù)合物。親和素(Avidin)存在于雞蛋中,分子量67001,是一種堿性蛋白。對(duì)*有很強(qiáng)的結(jié)合力。鏈霉親和素是從鏈霉菌中提取的一種蛋白質(zhì),分子量47000,等電點(diǎn)為6.0-6.5,也對(duì)*有很強(qiáng)的結(jié)合力,但其等電點(diǎn)接近中性,明顯消除了原堿性蛋白所引起的非特異性吸附。*活化后,可以標(biāo)記抗體和酶而不影響其活性。再經(jīng)SABC放大,一分子的抗體可以結(jié)合幾十分子的酶或者熒光素,從而有很強(qiáng)的放大作用。為了與一抗更好的配合,為了大家實(shí)驗(yàn)的方便,索萊寶公司特進(jìn)口分裝國(guó)外的SABC試劑盒,其包括過(guò)氧化物酶,堿性磷酸酶和FITC三大系列,配以其他相關(guān)試劑,可以滿足大部分免疫組化的工作需要。SABC試劑盒可按一抗種屬來(lái)源(小鼠、兔、山羊)和顯色方法(DAB、BCIP/NBT、FITC)來(lái)分。

試驗(yàn)原理:被石蠟包埋的組織切片在二甲苯中脫去石蠟并逐級(jí)水化后,進(jìn)行內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶淬滅。內(nèi)源性過(guò)氧化物酶可以被甲醇或Zymed'sPeroxo-Block(目錄號(hào):00-2015)中的3%的過(guò)氧化氫所抑制。

說(shuō)明:非免疫血清用來(lái)去除非特異性背景。孵育一抗后,加入二抗,再經(jīng)過(guò)一步?jīng)_洗,加入鏈霉親和素過(guò)氧化物酶藕聯(lián)物。

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