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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2024-03-20 07:20:06瀏覽次數(shù):331次
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CD80,人B7-1AELISA試劑盒多少錢
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人B7-1(CD80)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人B7-1(CD80)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
標(biāo)本收集
1. 本試劑盒可使用血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織液標(biāo)本。
2. 室溫(20-25℃)下保存標(biāo)本不要超過(guò)8小時(shí)。2-10℃保存標(biāo)本,不超過(guò)48小時(shí)。如
耽擱的時(shí)間更長(zhǎng),請(qǐng)?jiān)?20℃或更低的溫度下保存標(biāo)本。標(biāo)本避免多次凍融,這樣可能會(huì)損失蛋白活性,產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果。
準(zhǔn)備工作
1. 濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至 500ml)。
操作步驟
試劑盒應(yīng)平衡至室溫(20-25°C )再試驗(yàn)。 取出所需反應(yīng)板。
1. 加入10ul標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)、10ul標(biāo)本于相應(yīng)反應(yīng)板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒,封
住板孔,室溫溫育 45分鐘。
3. 洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液洗滌反應(yīng)板(每孔內(nèi)加入350ul洗滌液),并去除水滴
(在厚疊吸水紙上拍干);反復(fù)洗滌5次。
4. 每孔加入100ul顯色液, 輕輕混勻10秒,室溫溫育20分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液(Stop Solution)。輕輕混勻30秒;30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD
值。
以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
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