當(dāng)前位置:上海滬鼎生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>滬鼎教你如何避免ELISA實(shí)驗(yàn)中“花板”出現(xiàn)
Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中有很多因素影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致出現(xiàn)“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現(xiàn),降低檢測的假陽性率,獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,首先我們在選擇ELISA試劑時,應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗(yàn)的過程中應(yīng)采取下列措施:
(1)檢測之前,加大離心轉(zhuǎn)速,盡量延長時間,使血細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀,讓血細(xì)胞與血清*分離。
(2)抽取樣本時應(yīng)抽出足夠檢驗(yàn)量的血液標(biāo)本,選擇無添加劑的真空試管,ELISA試劑盒便于離心,得到足夠的血清。
(3)血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1~2h,使血液凝固收縮,然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮,讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至zui低。
(4)加樣時不能加入紅細(xì)胞或纖維蛋白,要按照操作說明書去做,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(5)封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
(6)手工洗板時應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出,連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。
(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度,尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板"問題。
(8)用洗板機(jī)洗板時應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
因此,ELISA試劑盒出現(xiàn)“花板"原因可能是在標(biāo)本的處理,特別是放置時間、離心速度和離心時間及溫度方面的問題。所以,標(biāo)本的處理就成為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要可疑因素。
上海滬鼎公司主要代理產(chǎn)品:
試劑盒:ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、放免試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、金標(biāo)檢測試劑盒、Omega試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。
各種動物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清、HyClone、GIBCO胎牛血清。
抗體:進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體。
細(xì)胞:*細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞
生化試劑:*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑。
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