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【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日淋巴瘤保存到液氮中。
A06253 人天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA Kit,48T/96T
A06254 人水蛭素(Hirudin)ELISA Kit,48T/96T
A06255 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA Kit,48T/96T
A06256 人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA Kit,48T/96T
A06257 植物激素脫落酸(ABA)ELISA Kit,48T/96T
A06258 人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA Kit,48T/96T
A06259 人未磷酸化類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1ELISA Kit,48T/96T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個(gè)/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A06233 人成熟促進(jìn)因子(MPF)ELISA Kit,48T/96T
A06234 *輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA Kit,48T/96T
A06235 人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA Kit,48T/96T
A06236 人上皮膜抗原(EMA)ELISA Kit,48T/96T
A06237 人傷寒抗原(St-Ag)ELISA Kit,48T/96T
A06238 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA Kit,48T/96T
A06239 人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA Kit,48T/96T
A06240 人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA Kit,48T/96T
A06241 人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA Kit,48T/96T
A06242 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA Kit,48T/96T
A06243 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA Kit,48T/96T
A06244 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA Kit,48T/96T
A06245 人*(FK506)ELISA Kit,48T/96T
A06246 人生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白(GHBP)ELISA Kit,48T/96T
A06247 人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA Kit,48T/96T
A06248 小鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA Kit,48T/96T
A06249 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit,48T/96T
A06250 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA Kit,48T/96T
A06251 人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA Kit,48T/96T
A06252 人受體*激酶(RTKs)ELISA Kit,48T/96T
 

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