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更新時間:2016-05-15 05:04:51瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞>50000個/瓶裝
【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞保存到液氮中。
A00666 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 Human thymus-leukemia antigen,TLa ELISA Kit 96T/48T
A00667 人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒 Human tumor specific transplantation antigen,TSTA ELISA Kit 96T/48T
A00668 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 Human Podocalyxin,PCX ELISA Kit 96T/48T
A00669 人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒 Human breast cancer susceptibility protein 1,BRCA-1 ELISA Kit 96T/48T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A00648 人利鉀尿肽(KP)ELISA試劑盒 Human kaliuretic peptide,KP ELISA Kit 96T/48T
A00649 人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA試劑盒 Human Neurotensin,NT ELISA Kit 96T/48T
A00650 人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒 Human Peptide γ,Pγ ELISA Kit 96T/48T
A00651 人C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒 Human C -type natriuretic peptide,CNP ELISA Kit 96T/48T
A00652 人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 Human Orexin A ELISA Kit 96T/48T
A00653 人腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 Human brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T
A00654 人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 Human Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 96T/48T
A00655 人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒 human oncostatin M receptor,OSMR ELISA Kit 96T/48T
A00656 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA試劑盒 human oncoprotein induced transcript 3,OIT3 ELISA Kit 96T/48T
A00657 人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒 Human permeability glycoprotein,P-gp ELISA Kit 96T/48T
A00658 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒 Human colon cancer-specific antigen-3,CCSA-3 ELISA Kit 96T/48T
A00659 人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒 Human colon cancer-specific antigen-2,CCSA-2 ELISA Kit 96T/48T
A00660 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒 Human colon cancer-specific antigen-4,CCSA-4 ELISA Kit 96T/48T
A00661 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 Human Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit 96T/48T
A00662 人*11(KLK 11)ELISA試劑盒 Human Kallikrein 11,KLK 11 ELISA Kit 96T/48T
A00663 人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 Human growth-regulated oncogeneγ/melanoma growth stimulating activity,GROγ/MGSA ELISA Kit 96T/48T
A00664 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒 Human growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity,GROβ/MGSA ELISA Kit 96T/48T
A00665 人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒 Human caenorhabditis elegans death gene,CED-3 ELISA Kit 96T/48T
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