橫紋肌肉瘤細(xì)胞 , A-204細(xì)胞5×10^5以上/1ml
對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞研究工作者來(lái)說(shuō)，橫紋肌肉瘤細(xì)胞 , A-204細(xì)胞污染那可是個(gè)糟糕的事情，也是比較容易出現(xiàn)的情況，我們?nèi)绾畏婪?，如何避免，是我們要學(xué)習(xí)和掌握的。
趨化因子C-基元配體2（XCL2）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Chemokine C-Motif Ligand 2 （XCL2） Homo sapiens （Human）
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1（VCC1）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 （VCC1） Homo sapiens （Human）
橫紋肌肉瘤細(xì)胞 , A-204細(xì)胞VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1（VCC1）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 （VCC1） Mus musculus （Mouse）
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1（VCC1）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 （VCC1） Rattus norvegicus （Rat）
白細(xì)胞介素24（IL24）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 24 （IL24） Homo sapiens （Human）
下面我們對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染情況，做個(gè)總結(jié)：
1）原蟲(chóng)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，zui終形成惡性循環(huán)。
2）霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見(jiàn)呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長(zhǎng)，但時(shí)間長(zhǎng)之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過(guò)氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過(guò)氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過(guò)氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或*或*或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，*或*或雙抗都于事無(wú)補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問(wèn)題，就要注意操作。
3）細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！ 可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
4）黑蛟蟲(chóng)：可以穿透濾膜，也可以通過(guò)空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見(jiàn)黑色的小蟲(chóng)游來(lái)游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無(wú)須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率。
5）真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開(kāi)始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
6）支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國(guó)內(nèi)血清很多都沒(méi)有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中zui常見(jiàn)的微生物之一。而且它不能用過(guò)濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂(lè)菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無(wú)任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。 也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（*和氨芐*）。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水2、超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素3、超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染4、無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
白細(xì)胞介素24（IL24）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 24 （IL24） Mus musculus （Mouse）
白細(xì)胞介素24（IL24）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 24 （IL24） Rattus norvegicus （Rat）
白介素20（IL20）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 20 （IL20） Homo sapiens （Human）
白介素29（IL29）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 29 （IL29） Homo sapiens （Human）
白介素22（IL22）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 22 （IL22） Homo sapiens （Human）
白介素22（IL22）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 22 （IL22） Mus musculus （Mouse）
生長(zhǎng)分化因子15（GDF15）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 （GDF15） Homo sapiens （Human）
生長(zhǎng)分化因子15（GDF15）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 （GDF15） Mus musculus （Mouse）
生長(zhǎng)分化因子15（GDF15）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 （GDF15） Rattus norvegicus （Rat）
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白B10（ABCB10）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for ATP Binding Cassette Transporter B10 （ABCB10） Homo sapiens （Human）
S100鈣結(jié)合蛋白（S100）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein （S100） Homo sapiens （Human）
S100鈣結(jié)合蛋白B（S100B）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein B （S100B） Homo sapiens （Human）
硫氧化還原蛋白（Trx）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Thioredoxin （Trx） Homo sapiens （Human）
*原片段F1+2（F1+2）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 （F1+2） Homo sapiens （Human）
*Ⅹ（F10）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Coagulation Factor X （F10） Homo sapiens （Human）
蛋白酶激活受體2（PAR2）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Protease Activated Receptor 2 （PAR2） Homo sapiens （Human）
血清淀粉樣蛋白A（SAA）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Serum Amyloid A （SAA） Homo sapiens （Human）
非神經(jīng)元性烯醇化酶（NNE）檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Enolase, Non Neuronal （NNE） Homo sapiens （Human）