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人T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA試劑盒 96T/48T
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA試劑盒96T/48T
多發(fā)骨髓瘤細胞,RPMI-8226細胞 人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA試劑盒96T/48T
人尿素酶相關蛋白C(UreC)ELISA試劑盒Human urease related protein C,UreC ELISA試劑盒 96T/48T
人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA試劑盒96T/48T
ATCC細胞株的品質,多發(fā)骨髓瘤細胞,RPMI-8226細胞國內細胞的價格。對于初做細胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經常出現細胞培養(yǎng)問題,公司在細胞培養(yǎng)問題方面做了些總結,希望對你們能有所幫助。
【多發(fā)骨髓瘤細胞,RPMI-8226細胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細胞,輕輕吹吸細胞獲得單細胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細胞。
【原代細胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復沖洗組織。
【培養(yǎng)細胞死亡】培養(yǎng)箱內無CO2。培養(yǎng)箱內溫度波動太大。細胞凍存或復蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產物堆積;檢測培養(yǎng)箱內CO2檢查培養(yǎng)箱內溫度;取新的保存細胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。試劑保存不當。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細胞濃度。
2)讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內用完。
8)接種細胞起始濃度太低,細胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細胞起始濃度。
10)換用新的保種細胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒Human golgi protein 73,GP-73 ELISA試劑盒96T/48T
人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒Human TU3A Protein ELISA試劑盒96T/48T
人電子轉移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA試劑盒96T/48T
人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒Human dermato-pontin,DPT ELISA試劑盒96T/48T
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA試劑盒96T/48T
人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒Human decay-accelerating factor,DAF ELISA試劑盒 96T/48T
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