1、 ELISA試劑盒要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20℃左右時(shí),1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
2、 在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3、 吸取液體時(shí)速度不且太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4、 將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭的液體和孔壁接觸,液體會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作使得部分液體不能流出而造成誤差。
5、 吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
6、 液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
7、 孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線形。
8、 實(shí)驗(yàn)前半個(gè)小時(shí)將ELISA試劑盒從冰箱中取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同。(酶標(biāo)板只要取出需要量)
9、 由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,因此要避光保存。
10、 手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,應(yīng)靜置15-30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將ELISA試劑盒酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。