雞ELISA試劑盒載體的外形主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不介入化學反應。板式及珠式ELISA的標本量一般為100-200ul,而小試管可根據(jù)需要加大反應體積,標本反應量的增加有助于試驗敏感性的進步。現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操縱的尺度化極為有利。為便于作少量標本的檢測,有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與尺度ELISA板相同。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,其吸附機能特別是對免疫球蛋白的吸附機能增加,應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測抗體時空缺值較大。1、競爭ELISA:此法主要用于測定小分子抗原及半抗原,其原理類似于放射免疫測定。
其基本程序為:
① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標抗原(對照孔僅加酶標抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
用雞ELISA試劑盒檢測儀測定OD值。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開,再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保存其免疫學活性,又保存酶的活性。專業(yè)技術員給大家提供ELISA相關文章。
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